ГОСТ 17290-71 С. 3
2.2.Опред елен ие реакции на рицин
2.2.1. Аппаратура, реактивы, материалы:
измельчитель лабораторный или ступка бронзовая;
центрифуга лабораторная электрическая с числом оборотов не менее 3001) в минуту:
сито штампованное с диаметром отверстий 1 мм;
встряхиватель механический;
шкаф сушильный с терморегулятором;
воронки стеклянные по ГОСТ 25336;
колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 50. 100 и 250 см1;
цилиндры измерительные с носиком по ГОСТ 1770. вместимостью 100 и 250 см’;
пипетки с делениями по ГОСТ 29227, вместимостью I и 5 см5;
пробирки стеклянные центрифужные по ГОСТ 25336. вместимостью 25 см’;
пробирки стеклянные химические по ГОСТ 25336:
колбы мерные с пришлифованными пробками по ГОСТ 1770. вместимостью 100 см’ или
цилиндры измерительные с пришлифованными пробками по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см1;
палочки стеклянные, оплавленные с обоих концов;
кровь кролика свежевзятая дефибринированная;
натрий хлористый по ГОСТ 4233, 0.9 %-ный раствор;
толуол по ГОСТ 5789;
бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026;
штатив для пробирок:
пробки корковые укупорочные центритные по ГОСТ 5541 или пробки резиновые конусные
по ТУ 38 105 1835-88.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
2.2.2. Подготовка к испытанию
Измельчают шрот до прохода через сито с диаметром отверстий 1 мм. Для приготовления
вытяжки взвешивают 20 г клещевинного шрота с точностью ±0.01 г, заливают 100 см’ раствора
хлористого натрия и перемешивают на механическом встряхнвателе в течение 30 мин.
После этого жидкость отфильтровывают через бумажный фильтр или центрифугируют, после
чего в вытяжку добавляют 0.2 см’ толуола.
Для приготовления кровяной взвеси 3 см’ свежевзятой дефибринированной крови наливают
в центрифужную пробирку, отмечая уровень крови на стенке пробирки. Затем кровь разбавляют
9 см’ раствора хлористого натрия, осторожно перемешивают и центрифугируют в течение 8 мин.
Осторожно пипеткой отбирают верхний слой жидкости, стараясь не задевать осадка эритроцитов.
Осадок вновь разбавляют 9 см’ раствора хлористого натрия, повторяют перемешивание, центрифу
гирование и удаление жидкости.
Если после вторичного промывания жидкость над осадком становится бесцветной и прозрач
ной. промывку заканчивают; в противном случае промывку’ повторяют.
Промытые эритроциты разбавляют раствором хлористого натрия до первоначального объема
крови (3 см’) и осторожно перемешивают.
Из смеси отбирают пипеткой 2 см’ и разбавляют раствором хлористого натрия до 100 см’ в
мерной колбе или цилиндре.
Полученную кровяную смесь хранят в холодильнике и используют в течение 4 сут.
Допускается применять в качестве дополнительного контрольного раствора вытяжку из семян
клещевины, приготовленную аналогично из шрота.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
2.2.3. Проведение испытания
Взбалтывают вытяжку и отбирают пипеткой по 5 см’ в две сухие пробирки. В две другие
пробирки для контроля берут по 5 см3 раствора хлористого натрия. Кровяную взвесь перед
использованием осторожно перемешивают 2—3 раза опрокидыванием колбы или цилиндра для
получения равномерной эмульсии кровяных шариков. Взбалтывание или встряхивание не рекомен
дуется. Сухой пипеткой отбирают по 4 см’ кровяной взвеси и добавляют в каждую пробирку
с испытуемой вытяжкой и с контрольным раствором хлористого натрия. Пробирки закрывают
корковыми или резиновыми пробками.
Содержимое пробирок осторожно перемешивают опрокидыванием и выдерживают в термо
стате в течение 1ч при 37 *С. По истечении этого времени содержимое пробирок вновь осторожно
перемешивают опрокидыванием так, чтобы все эритроциты поднялись со дна. и просматривают
содержимое пробирок, устанавливая отсутствие или наличие рицина.
Если рипин не обнаружен, пробирки остадтяют при комнатной температуре на 18 ч. после
чего содержимое пробирок осторожно перемешивают опрокидыванием и вновь устанавливают
отсутствие или наличие рицина.
105