С. 5 ГОСТ 25311-82
и ставят реакцию агглютинации на стекле с комплексной О-сывороткой. разведенной физиологи
ческим раствором в соотношении 1:5.
(Измененная редакция, Изч. № 1).
4.2.6. Если комплексные О-колнсыворотки в начальной реакции не агглютинируют антиген из
убитой нагреванием культуры, то готовят из этого штамма суспензию бактерий и автоклавируют ее
при давлении 105 Па (1 атм) в течение 2 ч для разрушения термостабильного А-антнгена. Автокла
вированный антиген исследуют с сыворотками 08. 09, 0101.
4.2.7. Обработка результатов
При наличии агглютинации дают заключение о присутствии в исследуемой муке энтеропато-
генных типов Е. Coli.
Кроме этого, энтеропатогенными признают культуры Е. Coli, которые:
серологически типизируются набором типоспенифических колисывороток, но не вызывают
гибель белых мышей:
серологически не типизируются, но вызывают гибель белых мышей.
4.3.О п р е д е л е н и е п р и с у т с т в и я б а к т е р и й из рода с а л ь м о н е л л
4.3.1. Метод выявления сальмонелл основан на определении их характерного роста на элек
тивных средах и установлении ферментативных и серологических свойств.
4.3.2. Навеску муки массой от 50 до 200 г помещают в колбу, содержащую одну из сред
предварительного обогащения (физиологический раствор, пептонная вода) при соотношении муки
и среды 1:5. Содержимое колбы тщательно перемешивают и помешают в термостат при температуре 37
‘С. Через 16—18 ч производят посевы на две (по выбору) основные среды обогащения (селени товый
бульон, магниевую среду, среды Киллиана, Мюллера, Кауфмана) в соотношении 1:5.
После 16—18 ч термостатировання при температуре 37 "С из обогатительных сред бактериоло
гической петлей производят посевы в чашки с твердыми дифференциально-диагностическими
средами висмут-сульфит агар, среды Плоскирева или Левина (но две чашки), которые помещают в
термостат при температуре 37 "С.
4.3.3. Засеянные чашки просматривают через 24—48 ч.
На висмут-сульфитагаре S. typhi, S. paratyphi А растут в виде мелких, нежныхсеровато*зеленых
колоний с черным центром; S. Cholerae suis —в виде зеленых колоний. Колонии почти всех других
сальмонелл значительно крупнее, темно-коричневого цвета с металлическим блеском, окруженные
светлым ореолом, цвет участка среды под колонией - черный.
На среде Плоскирева сальмонеллы растут в виде прозрачных или нежно-розовых колоний: на
среде Левина —прозрачные, бледные, нежно-розовые или розовато-фиолетовые колонии.
При обнаружении колоний, подозрительных на сальмонеллы, три-пять из них засевают на
комбинированные среды: Расселя, Крумвиде—Олькеницкого в модификации Ковальчука или трех
сахарную (лактоза, глюкоза, сахароза) «скошенный столбик* с мочевиной.
Высев колоний делают на короткий пестрый ряд, включающий скошенный агар и среды Гисса
с лактозой, глюкозой и сахарозой, а также на бульон Хоттингера для определения индола и
сероводорода.
Культуры, представляющие грамотринательные подвижные палочки, ферментирующие глюко
зу с образованием газа, не ферментирующие лактозу и сахарозу, не разлагающие мочевину и не
образующие индол, подвергаются серологическому исследованию —испытанию в реакции
агглю тинации на предметном стекле с поливалентной адсорбированной 0-сывороткой.
4.3.4. Обработка результатов
Обнаружение подвижных (кроме S. pullorum, S. gallinarum) грамотрицательных палочек, даю
щих характерный рост на элективных средах, не ферментирующих лактозу и сахарозу, ферментиру
ющих глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа (S.typhi suis не ферментирует маннит),
дающих положительную реакцию агглютинации с поливалентной адсорбированной 0-
сывороткой, указывает на наличие бактерий из рода сальмонелл.
4.3.3. 4.3.4. (Измененная редакция, Изм. № 1).
4.4. О п р е д е л е н и е п р и с у т с т в и я б а к т е р и й а н а э р о б о в
4.4.1. Метод основан на способности анаэробов расти в отсутствие кислорода воздуха, морфо
логии возбудителей, росте на питательных средах и на выявлении патогенности возбудителей путем
заражения лабораторных животных.
72