ГОСТ Р 51435-99
3.6.2 Расчет концентрации стандартного раствора патулнна
Концентрацию стандартного раствора патулнна (3.6.1) р,,,. мкг/см3, вычисляют по формуле
_ А М 1000 С
--------
1
-------
О)
где А —оптическая плотность стандартного раствора патулнна;
Л276 —молярный показатель поглощения раствора патулнна при длине волны 276 нм,
дм3
моль
’ ’ -
c
m
-1 (Апь = 14600);
М — молярная масса патулнна, г/.моль;
С — постоянная прибора (обычно С = /).
4
Приборы и лабораторное оборудование
Перед использованием лабораторное оборудование промывают раствором гипохлорита натрия
концентрации 10 г/дм3.
Обычное лабораторное оборудование, в частности следующее:
4.1 Жидкостный хроматограф, снабженный спектрофотометрическим детектором в ультрафи
олетовой области (пригодным для работы при длине волны 276 нм) и самописцем или интегратором.
4.2 Обращенно-фазовая колонка ODS” или другая аналогичная колонка со следующими
параметрами:
- эффективность не менее 35000 теоретических тарелок на метр;
- длина 250 мм;
- внутренний диаметр 4,6 мм;
- неподвижная фаза размером частиц 5 мкм.
5 Отбор проб
Проба, поступающая в лабораторию, должна быть представительной и без следов порчи или
изменения свойств продукта при транспортировании и хранении.
6 Проведение испытаний
6.1 Приготовление испытуемого раствора
При испытаниях концентрированных яблочных соков их разводят водой 1:5 по объему.
Дальнейшую процедуру проводят для всех продуктов одинаково, как описано ниже.
6.1.1 Пробу объемом 5,0 см3экстрагируют порцией этилацетата объемом 5,0 см3(3.1) в тече
ние не менее 1 мин. Экстракцию повторяют еще два раза новыми порциями этилацетата объемом
по 5,0 см3. Этилацетатные фазы объединяют и эктрагируют раствором карбоната натрия (3.3)
объемом 2,0 см3.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Экстракцию раствором карбоната натрия проводят как можно бы
стрее, например в течение 1—2 мин, из-за нестабильности патулнна в щелочной среде.
6.1.2 Карбонатную фазу (6.1.1) экстрагируют свежей порцией этилацетата объемом 5,0 см3,
экстракт объединяют с предыдущими порциями. Карбонатную фазу отбрасывают. К экстракту
добавляют 5 капель уксусной кислоты (3.5), смесь перемешивают и упаривают на ротационном
испарителе до объема 1—2 см3.
6.1.3 Полученный таким образом раствор количественно переносят во флакон вместимостью
около 5 см5 с помощью нескольких порций этилацетата объемом около I см3 каждая. Раствор
упаривают досуха в токе азота при температуре 40 ‘С. Остаток растворяют в 0,5 см3подвижной фазы
(3.2) или ацетатного буфера (3.4).
6.2 Построение градуировочного графика
Порции стандартного раствора патулнна (3.6.1) объемом 1,0; 2,0; 3.0; 5.0 и 7,5 см3 переносят
пипеткой в пять мерных колб с одной отметкой вместимостью 10 см3, объем содержимого в колбах
доводят до метки ацетатным буфером (3.4); получают градуировочные растворы.
Устанавливаютскорость потока подвижной фазы через колонку жидкостного хроматографа около
1см3/мин. Чувствительность детектора хроматографа устанавливают таким образом, чтобы оптической
плотности 0,01 соответствовал сигнал величиной на полную шкалу регистрирующего устройства.
13ODS —окгадсцилсилан.
2
1
%