Стр.
6 ГОСТ 25384— 82
мостат при 37°С на 30 мин, после чего к ним добавляют суспензию
эритроцитов, сенсибилизированных гемолизином, в объеме 0,2 см3
(пробирки) или 0,05 см3 (лунки), энергично встряхивают и выдер
живают при 37°С в течение 20 мин.
Пробирки или панели извлекают из термостата или водяной
бани и осаждаютэритроцитыцентрифугированием втечение
5 мин с частотой вращения 600 об/мин или отстаиванием в тече
ние 2—3 ч при комнатной температуре.
При исследовании недоброкачественных афтозных материалов,
а также при исследовании сердечной мышцы объем исследуемых
суспензий увеличивают в 4 раза при сохранении объема и концен
трации остальных компонентов реакции в обычных пределах.
Для повышениячувствительности РСКприменяют реакцию
длительного связывания комплемента (РДСК), при которой пер
вая фаза протекает при 4°С в течение 16—20 ч.
2.1.4. Обработкарезультатов
Оценку результатов проводят визуально.
Реакцию считают положительной, если в ряду пробирок (лу
нок) с какой-либо штаммоспецифической сывороткой отмечается
задержка гемолиза не менее 50% эритроцитов при полном гемо
лизе в параллельных рядах с другими штаммоспецифическими сы
воротками и в контроле с пробами патологического материала на
антикомплементарность. Возбудитель относится к тому варианту
вирусов ящура, с сывороткой которого титр исследуемой суспен
зии окажется выше.
Отрицательная реакция не исключает яшура или иного сход
ного с ним заболевания, поскольку концентрация вирусоспецифи
ческого антигена в исследуемом материале может оказаться слиш
ком низкой для обнаружения в РСК.
2.2. Методы выявления вируса
Сущность методов заключается ввыявлении биологического
действия вируса на восприимчивые и чувствительные биологиче
ские системы и его последующей идентификации серологическим
методом.
2.2.1. А ппа р а ту р а, материалыи р а с т в о р ы
2.2.1.1. Для проведения исследования применяют:
термостат с температурой нагрева 37°С;
пипетки вместимостью до 10 см3 с ценой деления 0,01 см3 по
ГОСТ 20292—74;
культуры монослойные первичных клеток почки свиней (СП),
телят, взрослого крупного рогатого скота (ВП) и ягнят (ПЯ) и
перевиваемых линий ВНК-21 и IB-RS-2 в пробирках и флаконах
вместимостью 50, 100, 500 и 1000 см3;
среду питательную для культивирования клеток с 0,5% гидро
лизата лактабумина (pH 7,4—7,6);