Cip. 6 ГОСТ 2J7S1—83
биотипами. Затем готовят необходимый объем вируса, содер
жащего 1000 ТЦДгжми добавляют равныйобъем его в
каждую пробирку с последовательными разведениями сывороток.
Смесь сывороток и вируса встряхивают, выдерживают при темпе
ратуре 37 °С в течение 1 ч, после чего в -1 пробирки с культурой
клеток вносят по 0,2 см3 смеси сыворотки и вируса и выдержи
вают при температуре 37°С в течение 30 мин. По истечении ука
занного срока в пробирки с культурой клеток вносят по 1,8 см*
поддерживающей питательной среды. Одновременно ставят сле
дующие конгроли:
контроль незараженных культур клеток в 3—4 пробирках, в
которых проводят смену питательной среды;
контроль дозы вируса. Для контроля точности дозы вируса, взя той
в реакцию, из рабочего разведения вируса (1000 ТЦДнмисы*)
готовят разведения до 1<Н. Для каждого разведения
вируса используют 3—4 пробирки с культурой клеток. В про
бирки с культурой клеток вносят рабочее разведение вируса и
последовательные его разведения в объеме по 0,1 см*. После
контакта при температуре 37°С в течение 30 мин в пробирки с
культурой клеток добавляют 1,9 см* поддерживающей питатель
ной среды;
контроль токсичности сыворотки. Для определения токсич
ности сыворотки в пробирочные культуры вносят по 0,1 см* разве
дения сыворотки и по 1,9 см* поддерживающей питательной сре ды
(по 3—А пробирки с культурой клеток на каждое разведение
сыворотки);
контроль специфичности вируса. Пробирки с культурой клеток
инфицируют смесью вируса в рабочей дозе с двукратным разведе
нием специфической сыворотки до ее титра (по 3—4 пробирки с
культурой клеток для смеси каждого разведения специфической
сыворотки + вирус).
Все пробирки с культурами клеток, используемые в- реакции,
инкубируют при температуре 37СС.
Проводят ежедневный микроскопическийконтроль клеточ
ных культур. Учет реакциипроводят при появлениицитопзти-
ческого действия вирусав контроле дозы вируса,взятой для
реакции нейтрализации.
5.4. О б р а б о т к ар е з у л ь т а т о в
Результат серологического исследования испытуемых сыво
роток считают положительным при отсутствии цитопатического
действия о разведениях сыворотки 1:2 и выше при наличии сле
дующих результатов в коитролях:
в контроле культуры клеток не должно быть изменений моно-
c.юя клеток;