8
- Подготовка к испытаниям
- Приготовление раствора Карреза I
Железистосинеродистый калий по ГОСТ 4207 массой (3,60 + 0,01) г растворяют в воде по 8.26 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки водой, перемешивают.
Раствор при необходимости хранят при температуре 4 °С в течение 1 мес.
- Приготовление раствора Карреза II
Сернокислый цинк по ГОСТ 4174 массой (7,20 + 0,01) г растворяют в воде по 8.26 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки водой, перемешивают.
Раствор хранят в темном месте при комнатной температуре в течение 6 мес.
- Приготовление буферного раствора
Натрий дифосфат по ГОСТ 342 массой (4,50 + 0,01) г растворяют в 60 см3 воды по 8.26 в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Добавляют раствор соляной кислоты молярной концентрацией 1,0 моль/дм3 по 8.21 в объеме, достаточном для установления по pH-метру по 8.4 значения pH раствора (9,0 + 0,1) ед. pH. Объем раствора в колбе доводят до метки водой, перемешивают.
Раствор при необходимости хранят при температуре 4 °С в течение 2 мес.
- Приготовление реакционной смеси
ß-Никотинамид-аденин-динуклеотид 4-водный окисленной формы по 8.23 массой (0,1140 + 0,0001) г и альдегиддегидрогеназу по 8.24 массой (0,0033 + 0,0001) г растворяют в буферном растворе, приготовленном по 9.3, в мерной колбе вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки буферным раствором, перемешивают.
Раствор хранят при температуре 4 °С в течение одного дня.
- Приготовление суспензии алкогольдегидрогеназы
К алкогольдегидрогеназе по 8.25 массой (0,7500 + 0,0001) г добавляют раствор сернокислого аммония молярной концентрацией 3,2 моль/дм3 по 8.22 в мерной колбе вместимостью 25 см3 по ГОСТ 1770. Объем раствора в колбе доводят до метки раствором сернокислого аммония, перемешивают.
Раствор при необходимости хранят при температуре 4 °С в течение 4 мес.
- Приготовление раствора пробы
В стакан вместимостью 100 см3 по ГОСТ 25336 взвешивают пробу меда массой (20,000 + 0,001) г, подготовленного по разделу 6. К пробе приливают 10—20 см3 воды по 8.26, мед тщательно растирают стеклянной палочкой и переносят жидкость в мерную колбу вместимостью 100 см3 по ГОСТ 1770. Обработку пробы повторяют два-три раза до полного растворения меда, затем стакан несколько раз обмывают небольшими порциями воды по 8.26, которые также сливают в мерную колбу, при этом объем жидкости не должен превышать 2/3 объема колбы. Добавляют по 1 см3раствора Карреза I, приготовленного по 9.1, и раствора Карреза II, приготовленного по 9.2, перемешивают. Объем раствора в колбе доводят до метки водой по 8.26, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 24 ч.
На следующий день содержимое колбы фильтруютчерез бумажный складчатый фильтр в коническую колбу вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336.
Примечание — При фильтровании растворов фильтрат должен стекать по стенке сосуда. Раствор не должен капать в колбу.
- Проведение испытаний
- В две конические колбы вместимостью 25 см3 по ГОСТ 25336 вносят по 3 см3 реакционной смеси, приготовленной по 9.4. В первую колбу добавляют 0,50 см3 раствора пробы, приготовленного по 9.6, во вторую колбу — 0,50 см3 воды по 8.26. Колбы закрывают пробками или лабораторной пленкой, хорошо встряхивают.
Примечание — Пипетку или наконечник пипетки перед дозированием раствора пробы ополаскивают не менее двух раз испытуемым раствором.