7
Описание химических процессов
- Этанол меда окисляется до ацетальдегида никотинамид-аденин-динуклеотидом (НАД) в присутствии фермента алкогольдегидрогеназы (ADH)
Этанол + НАД+ —ADH > ацетальдегид + НАДН + Н+
Равновесие этой реакции смещено в сторону этанола и НАД+. В щелочной среде и при улавливании образовавшегося ацетальдегида равновесие может быть смещено в сторону выхода продуктов реакции.
- Ацетальдегид в присутствии альдегиддегидрогеназы (Al-DH) количественно окисляется до уксусной кислоты
Ацетальдегид + НАД+ + H2O ——DH > уксусная кислота + НАДН + Н+
- Количество образовавшегося НАДН эквивалентно содержанию этанола в меде.
- Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы
- Спектрофотометр, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 340 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.
- Весы по ГОСТ Р 53228 высокого класса точности с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более + 0,01 мг.
- Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее производить равномерный нагрев до температуры 40 °С.
- pH-метр/иономер с пределами допускаемой основной абсолютной погрешности прибора при преобразовании измеренного значения ЭДС в pX (pH) + 0,02 ед. pX (pH).
- Секундомер механический СОСпр-26-2-000.
- Сито из нержавеющей стали, диаметр отверстий 0,5 мм по ГОСТ Р 51568.
- Шпатель лабораторный ШЛ.
- Термометр ртутный стеклянный лабораторный с диапазоном значений от 0 °С до 100 °С и ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.
- Колбы мерные 1(2)-100-2(ПМ) по ГОСТ 1770.
- Колбы конические Кн-1(2,3)-25(250)-14/23(29/32)ТС по ГОСТ 25336.
- Пипетки 1-2-1-1(5, 10) по ГОСТ 29227.
- Пипетка одноканальная переменного объема с диапазоном дозирования (5—50) мкп.
- Цилиндры 3-100-2 по ГОСТ 1770.
- Стаканы В-1-100 ТС по ГОСТ 25336.
- Воронка лабораторная В-75-110 ХС по ГОСТ 25336.
- Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026, марки Ф или ФС или фильтры обеззо- ленные (синяя лента).
- Палочки стеклянные лабораторные оплавленные длиной от 15 до 20 см.
- Калий железистосинеродистый 3-водный по ГОСТ 4207, х. ч.
- Цинк сернокислый 7-водный по ГОСТ 4174, х. ч.
- Натрий дифосфат 10-водный по ГОСТ 342, ч. д. а.
- Кислота соляная по ГОСТ 3118, х. ч., раствор молярной концентрацией 1,0 моль/дм3.
- Аммоний сернокислый по ГОСТ 3769, х.ч., раствор молярной концентрацией 3,2 моль/дм3.
- р-Никотинамид-аденин-динуклеотид4-водный окисленной формы с содержанием основного вещества не менее 98,0 %.
- Альдегиддегидрогеназа из дрожжей, с удельной ферментативной активностью не менее 15 Е/мг протеина.
- Алкогольдегидрогеназа из дрожжей, с удельной ферментативной активностью не менее 300 Е/мгпротеина.
- Вода для лабораторного анализа по ГОСТ Р 52501, степень чистоты 2.
Допускается использование других средств измерений и вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.
Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже указанных.