14
- Метод установления интенсивности инвазии
Интенсивность инвазии устанавливают подсчетом числа яиц гельминтов в трех каплях анализируемой пробы массой 1 г при микроскопиииделением полученногочисла на Звсоответствиис таблицей 1.
Полученное число показывает ориентировочную интенсивность гельминтозной инвазии в одной капле анализируемой пробы.
При установлении интенсивности инвазии учитывают одновременное присутствие разных видов нематод, цестод, трематод и паразитических простейших.
- Метод Романенко и Гуджабидзе для исследования почвы на наличие яиц гельминтов
Исследование почвы на наличие яиц гельминтов проводят на разном удалении от животноводческих помещений, на пастбище и других местах с поверхности и различной глубине.
25 г анализируемой пробы почвы, отобранной по 6.2, помещают в центрифужные пробирки вместимостью 80—100 см3 и заливают 3 %-ным раствором едкого натрия или калия в соотношении 1:1.
Содержимое пробирок тщательно размешивают при помощи электромешалки или стеклянных палочек, отстаивают в течение 20—30 мин, затем центрифугируют в течение 5 мин при 800 об/мин. Надо- садочную жидкость сливают, а почву промывают водой от одного до пяти раз в зависимости от типа почвы (для песчаных и супесчаных почв достаточно одной промывки, для глинистых, суглинистых, черноземных — от двух до пяти раз) до получения прозрачной надосадочной жидкости.
После промывки к почве добавляют 45 см3 насыщенного раствора натрия нитрата, тщательно размешивают и центрифугируют в течение 3 мин. При отсутствии натрия нитрата можно использовать раствор магния сульфата. После центрифугирования пробирки со смесью ставят в штатив и осторожно доливают раствор натрия нитрата до образования выпуклого мениска, а затем покрывают предметными стеклами размером 10 х 6 см, предварительно обезжиренными смесью спирта с эфиром (в соотношении 1:2) или прокипяченными в воде со щелочью или стиральным порошком. Смесь в пробирках отстаивают в течение 30 мин.
Во время отстаивания яйца нематод всплывают на поверхность и прилипают к стеклу. Затем стекла снимают, а на ихместо ставятчистые. На снятые стекла наносят несколько капель 50 %-ного водного раствора глицерина, капли накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Затем просматривают вторые стекла.
Для обнаружения яиц гельминтов предметные стекла просматривают при увеличении 80 раз (окуляр 10 х объектив 8), а для определения степени развития, жизнеспособности и степени деформации — при увеличении в 400 раз (окуляр 10 х объектив 40). Подсчитанное в двух предметных стеклах количество яиц нематод по видам дает характеристику степени загрязнения или обсеменности разных проб почвы яйцами гельминтов.
- Метод исследования промежуточных и дополнительных хозяев нематод, цестод и трематод на зараженность
- Общие положения
Промежуточных и дополнительныххозяев нематод, цестод и трематод собирают в местах вероятного обитания и исследуют их в живом виде.
Примечание — Инвазированные промежуточные хозяева являются источниками заражения животных гельминтами. Роль промежуточных хозяев выполняют различные представители беспозвоночных и позвоночных животных, в том числе млекопитающих, но в основном это беспозвоночные: брюхоногие и двустворчатые моллюски, малощетинковые, ракообразные, насекомые, паукообразные (отряд Parasitiformes — кпещи) и др.
Собранныхпромежуточныххозяев вскрывают, расчленяютиисследуюттелобеспозвоночногопод стереоскопическим микроскопом. При этом применяют метод компрессорного исследования.
Беспозвоночное животное или части его тела кладут на предметное стекло, накрывают вторым предметным стеклом и, сдавливая, микроскопируют. Если беспозвоночные малых размеров и прозрачные (цикпопиды, дафниды и пр.), то их накрывают покровным стеклом и микроскопируют при легком надавливании на покровное стекло препаровальной иглой.
Также применяют два ускоренных метода массовых исследований промежуточных хозяев.
Первый заключается в переваривании промежуточных хозяев в искусственном желудочном соке