11
- Метод Болховитинова для выявления яиц трематод
В лабораторные пробирки наливают по 6—8 см3 насыщенного раствора хлорида натрия и вставляют в штатив наклонно, помещая нижний конец пробирки в гнездо, не противоположное верхнему отверстию, а в соседнее.
Анализируемые пробы фекалий массой 1—2 г тщательно размешивают в ступке с 10—15 см3 дистиллированной воды комнатной температуры. Затем медленно по стенкам воронки через двойной слой марли процеживают содержимое из ступки в пробирку таким образом, чтобы фекальная смесь оказалась в поверхностном слое раствора соли.
Рекомендуемое время отстаивания — 30—90 мин. За это время тяжелые яйца трематод оседают на дно пробирки. Затем верхний слой сливают, а осадок помещают на часовое или предметное стекло и исследуют под микроскопом.
- Комбинированные (седиментационно-флотационные) методы
- Сущность методов
Комбинированные (седиментационно-флотационные) методы основаны на комбинации противоположных приемов обработки проб фекалий — седиментации и флотации, благодаря чему происходит обогащение осадка или поверхностной пленки яйцами гельминтов и удаление излишних посторонних частиц взвеси, которые значительно мешают исследованию.
Методы более трудоемкие, однако, при некоторых гельминтозах более информативны.
- Метод Дарлинга
Анализируемую пробу массой 1 г заливают в ступке 5 см3 дистиллированной воды, тщательно размешивают, добавляя дистиллированную воду до 15 см3. Затем полученную взвесь процеживают через сито в стакан и отстаивают в течение 5 мин. После отстаивания верхний слой жидкости сливают, а на дне оставляют осадок с водой, который переносят в центрифужную пробирку. Наполненные до одинакового уровня пробирки центрифугируют с частотой вращения 2000 об/мин в течение 2 мин. После чего жидкость из пробирок сливают, а к осадку добавляют 10 см3 флотационного раствора натрия хлористого по 7.3.1.1, тщательно перемешивают до получения взвеси и опять центрифугируют в течение 2 мин.
Затем металлической петлей снимают из каждой пробирки по три капли поверхностной взвеси, переносят на предметное стекло и препарат исследуют под микроскопом.
- Метод Щербовича
Испытания проводят по 10.4.2, а в качестве флотационного раствора используют насыщенный раствор сульфата магния по7.3.1.3.
- Метод Вишняускаса
Применяется для диагностики фасциолеза, стронгилятозов желудочно-кишечного тракта, трихо- цефалеза, цестодозов и диктиокаулеза жвачных животных.
Анализируемую пробу фекалий массой 3 гот крупного рогатого скота и 1 гот овец тщательно размешивают с 50 см3 дистиллированной воды в ступке, затем фильтруют через сито в стеклянную посуду вместимостью 100 см3. Ступку прополаскивают несколько раз 50 см3 дистиллированной воды, которой промывают фекальные массы на сите. 100 см3 полученного фильтрата отстаивают в течение 5 мин, затем верхний слой жидкости отбирают спринцовкой или осторожно сливают, оставляя на дне 20 см3 жидкости с осадком.
К жидкости с осадком добавляют 80 см3 дистиллированной воды и вновь отстаивают в течение 5 мин. После чего надосадочную жидкость отбирают спринцовкой или сливают, оставляя на дне 10 см3 жидкости, которую перемещают в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 1 мин при 1500 об/мин.
Затем верхний слой жидкости отбирают спринцовкой или сливают, оставляя только осадок. К осадку постепенно добавляют раствор сульфата цинка по 7.3.2 так, чтобы мениск жидкости образовался выше краев центрифужной пробирки. Центрифужную пробирку покрывают покровным стеклом так, чтобы жидкость всей своей поверхностью соприкасалась с покровным стеклом. Заблаговременно перед началом испытания края центрифужных пробирок шлифуют на бруске. Центрифугируют в течение 0,5 мин при 1500 об/мин.
Яйца гельминтов всплывают и прилипают к покровному стеклу. Покровное стекло с яйцами снимают и помещают на предметное стекло, предварительно нанеся одну каплю дистиллированной воды, и исследуют под микроскопом.