12
- Гельминтолярвоскопические методы диагностики нематодозов
- Сущность методов
Методы гельминтолярвоскопии позволяют обнаружить в фекалиях личинок и определить по ним возбудителей гельминтозов. Гельминтолярвоскопию используют для диагностики диктиокаулезов жвачных, протостронгилеза, мюллериоза, цистокаулеза овец, эляфостронгилеза оленей и других.
Анализируемые пробы свежих фекалий исследуют не позднее четырех часов после отбора, при этом шарики фекалий разрушают.
- Метод Бермана-Орлова для диагностики нематодозов
5ганализируемой пробы фекалий овец (коз) или 10ганализируемой пробы фекалий крупного рогатого скота (оленей) заворачивают в кусочек марли и помещают в воронку на металлическое сито. Предварительно в воронку наливают дихлорированную воду температурой 40 °С. Заполненный анализируемой пробой фекалий и дистиллированной водой аппарат Бермана оставляют при комнатной температуре на 3 ч.
Личинки нематод обладают термотропностью и благодаря этому перемещаются из анализируемой пробы фекалий в теплую воду и оседают на дно пробирки. Перед испытанием пробирки осторожно разъединяют с резиновой трубкой и быстрым движением, не встряхивая осадок на дне, сливают жидкость из пробирки до осадка. Так снимают все пробирки в аппарате и ставят их в штатив. Осадок разливают на часовые или предметные стекла и микроскопируют. При осмотре под микроскопом личинки нематод подвижные, и их легко найти.
Эффективность метода для выявления зараженных диктикаулюсами животных составляет 80 %.
- Метод Вайда для диагностики диктиокаулеза, протостронгилеза, мюллериоза и
цистокаулеза овец и коз
На часовое или предметное стекло кладут несколько шариков свежевыделенных фекалий коз или овец идобавляют небольшое количестводистиллированнойводытемпературой около 40 °С. По истечении 40 мин шарики фекалий удаляют, оставшуюся жидкость на стекле исследуют под микроскопом на наличие личинок нематод.
Эффективность метода для выявления инвазированных диктикаулюсами овец при интенсивной инвазии составляет 70 %.
- Метод Шильникова (упрощенный метод Бермана)
Анализируемые пробы фекалий заворачивают в марлевые салфетки, раскладывают по стаканчикам вместимостью 30 см3, имеющих форму усеченного конуса и сферическое дно (выпуклость дна направлена кверху), заливают теплой водой и оставляют на 8—10 ч.
После этого анализируемые пробы осторожно вынимают, а жидкость отстаивают в течение 10—15 мин. Затем стаканчики медленно наклоняют, сливают воду до появления мути и дают отстояться остатку жидкости в течение 5—10 мин. После этого стаканчик наклоняют и из него пипеткой отбирают верхний прозрачный слой воды до тех пор, пока в пипетку не начнет всасываться осадок на дне. После удаления лишней воды на дне стаканчика остается 0,5—1,0 см3 жидкости, которую пипеткой каплями наносят на предметное или часовое стекло и исследуют под микроскопом.
В случае, когда в стаканчике образуется густой осадок, наливают дистиллированную воду, осадок взбалтывают, дают отстояться в течение 10—15 мин, а затем воду сливают. Осадок просматривают порциально, каплями, так как при этом затрачивается меньше времени и концентрация личинок на единицу площади в нихдовольно большая.
Эффективностьметодадлявыявлениязараженныхдиктиокаулюсамиживотныхсоставляет75%.
Примечание — На препарате часто скапливается много личинок нематод, которых трудно дифференцировать из-за их подвижности. Для прекращения движения предметное стекло с личинками нематод нагревают над пламенем спиртовки.
Также личинки нематод можно обездвижить прибавлением двух-трех капель раствора, состоящего из двух частей жидкости Барбагалло, двух частей дистиллированной воды и одной части 5 %-ного раствора йода. После этого осадок взбалтывают и выливают на стекло для микроскопирования. Личинки теряют подвижность без нарушения своей структуры.
Для дифференциации личинок диктиокаулюсов применяют метод окрашивания. К осадку в пробирке или вылитому на стекло добавляют одну-две капли 0,1 %-ного водного раствора метиленового синего. Осадок встряхивают и через 20—30 с микроскопируют. В результате личинки диктиокаулюсов овец окрашиваются в ярко-сиреневый, телят — в светло-сиреневый цвет, личинки других нематод остаются неокрашенными, частицы корма окрашиваются в зеленый цвет, а жидкость — в голубой.
- Методы определения количества яиц нематод, цестод и трематод в фекалиях
- Определение количества яиц нематод, цестод и трематод с помощью счетной камеры
Горяева
1 г фекалий размешивают в ступке с 15 см3 дистиллированной воды и тщательно гомогенизируют.