ГОСТ 7702.2.3-93
мочевины, образование индола, сероводорода, ацетил-метил-карбинола (реакция Фогес-Проскауэ-
ра). утилизацию цитрата, расщепление аминокислот.
2.2.1 Для выявления расщепления сахаров используют либо среды Гисса по ГОСТ 7702.2.0/
ГОСТ 1’ 50396.0. 2.4.19. либо одну из комбинированных сред (Клиглера, Ресселя, агар тройной са
харный по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0. 2.4.20-2.4.22).
Язя посевов в среды Гисса часть каждой из пяти отобранных подозрительных колоний снима
ют бактериологической петлей, размешивают в 0.5—1см3стерильного физиологического раствора.
Полученную взвесь засевают в среды Гисса, инкубируют при (37±1)*С в течение 12—18 ч, после
чего посевы просматривают. При образовании кислоты меняется цвет среды.
Посев на одну из комбинированных сред проводят штрихом на скошенную часть и уколом в
столбик. Посевы инкубируют при (37il) ’С. учет проводят через (24Д.1) ч.
При ферментации лактозы, сахарозы в скошенной частистолбика комбинированных сред происхо
дит пожелтение. Покраснение или пожелтение самого столбика указывает на растепление глюкозы.
Сальмонеллы не рапагают лактозу и сахарозу, расщепляют глюкозу с образованием кислоты и
газа, а маннит —с образованием кислоты.
2.2.2 Для выявления расщепления мочевины используют одну из сред: агар тройной сахарный
или скошенный агар с мочевиной по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.4.24.
Восстановление изменившегося цвета среды агара тройного сахарного при расщеплении глю
козы (см. 2.2.1) с красного или желтого цвета до бледно-розового свидетельствует о расщеплении
мочевины.
Посевы на поверхность скошенного агара с мочевиной инкубируют при температу ре (37±1) *С
в течение (24i!) ч. Окрашивание среды в красный цвет происходит при расщеплении мочевины.
Отсутствие изменения окраски —отрицательная реакция.
Сальмонеллы мочевину не расщепляют.
2.2.3 Для выявления образования индола проводят посев в одну из питательных сред:
I %-ную пептонну ю воду по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.3.2 или в триптон-триптофановую
среду по ГОСТ 28560. Посевы инкубируют при (37x1) *С в течение (24±1) ч.
В пробирки с суточной культурой в пел гонкой воде по стенке добавляют 5—10 капель одного из
реактивов: Эрлиха или Ковача по ГОСТ 28560. В первом случае при наличии индола не позднее чем
через 5 мин в пограничном слое образуется ярко-красное кольцо, при отсутствии —кольцо остается
светло-желтого цвета. Во втором случае после взбалтывания результаты учитывают через 10 мин: реак
тив поднимается на поверхность среды и при наличии индола окрашивается в темно-красный цвет.
В пробирку с суточной культурой в трнптон-триптофановой среде добавляют I см3 реактива
Эрлиха или Ковача. Темно-красное кольцо —реакция положительная; коричнево-желтое кольцо —
реакция отрицательная.
Сальмонеллы индола не образуют.
2.2.4 Для выявления образования сероводорода используют одну из питательных сред: агар
тройной сахарный, или среду Клиглера, или 1%-ную пептонну ю воду. Посевы инкубируют при
(3x1) *С в течение 24—72 ч.
При посеве культуры в одну из комбинированных сред об образовании сероводорода судят по
почернению среды в столбике.
При посеве культуры в 1%-ную пептонную воду в пробирку под пробку помешают полоску филь
тровальной бумаги, предварительно смоченную уксуснокислым свинцом и высушенную по
ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Г 50396.0, 2.3.21. Полоска не должна соприкасаться с питательной средой. При
выделении культурой сероводорода через 24—72 ч инкубирования бумажка с уксуснокислым свинцом
чернеет.
Сальмонеллы выделяют сероводород.
2.2.5 Для выявления утилизации цитрата культуру высевают на скошенный столбик агара
Симмонса по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.4.23, инкубируют при (37±1)*С в течение
(24±1) ч. Окрашивание среды в синий цвет —положительная реакция, отсутствие измене ний
—отрицательная реакция.
Сальмонеллы, за небольшим исключением, дают положительную реакцию.
2.2.6 Для выявления способности культуры к образованию ацетил-метнл-карбинола (реакция
Фогес-Проскауэра) засевают ее в среду по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.4.25. Посевы инкуби
руют при (37x1) ”С в течение (24±3) ч, после чего переносят 1см3посева в пустую пробирку, добав
ляют 0,2 см3 раствора гидроокиси калия по ГОСТ 7702.2.0/ГОСТ Р 50396.0, 2.3.19 и 0.6 см3
2