ГОСТ I» 51427-99
Нанеску оксалата аммония массой 3.55 г переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3,
растворяют в 100 — 200 см5 воды, объем содержимого в колбе доводят водой до отметки.
6.3 Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ
Подвижную фазудля ВЭЖХ готовят смешиванием 200см3ацетонитрила, N00см1воды и 0.5 см3
уксусной кислоты.
7 Проведение испытаний
7.1 Экстракция геспериднна и иарингина из пробы сока
Проводят два параллельных определения.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 пипеткой вносят 10 см3 исследуемой пробы, 10 см3
раствора оксалата аммония концентрации 0,025 моль/дм3 и 10 см’ диметилформамида. Объем со
держимого п колбе доводят водой до отметки, содержимое колбы тщательно перемешивают.
После этого колбу с раствором выдерживают на водяной бане при температуре 90‘С в течение
10 мин, затем колбу с раствором охлаждают до комнатной температуры и содержимое колбы
фильтруют через мембранный фильтр. Фильтрат используют для хроматографического анализа.
7.2 Хроматографический анализ
Хроматографический анализ рабочих стандартных растворов геспериднна и партийна и
экстрактов из пробы, приготовленных по 7.1, проводят при следующих условиях:
Состав подвижной фазы— по 6.4;
Скорость потока подвижной фазы — 1.0 см3/мин;
Длина волны детектора— 287 нм для детектора с переменной длиной волны;
280 нм для детектора с фиксированной длиной волны;
Чувствительность детектора—0,05 —0,2 единиц оптической плотности на полную
шкалу;
Объем анализируемого раствора— полное заполнение петли инжектора.
Анализ рабочих стандартных растворов проводят непосредственно перед анализом каждой
серии экстрактов.
Регистрируют плошали пиков и время удерживания геспериднна и иарингина.
Если плошать пика анализируемого вещества в экстракте из пробы превышает плошать пика
этого вещества в рабочем стандартном растворе наибольшей концентрации, экстракт из пробы
разводят водой, используя пипетку и мерную колбу подходящей вместимости, и проводят его
повторный хроматографический анализ.
Из-за ограниченной стабильности экстрактов продолжительность проведения испытания не
должна превышать 24 ч.
8 Обработка и оформление результатов
Обработку результатов испытания проводят по методу внешнего стандарта, исходя из линейной
зависимости площади пика от концентрации геспериднна и иарингина.
Массовую концентрацию геспериднна или иарингина х, мг/дм3, вычисляют по формуле
S- V
х=тгт-
(,)
где S — площадь пика геспериднна или иарингина при анализе экстракта из пробы, ед. плот.;
У, —объем, до которого доведена проба при приготовлении экстракта, см3;
V, —объем пробы, взятый для приготовления экстракта, см3;
к —градуировочный коэффициент соответственно для иарингина или геспериднна, ед. площ. х
хдм’/мг, рассчитываемый по формуле
к
(
2
)
где 5’, —площадь пика геспериднна или иарингина при анализе рабочего стандартного раствора,
ед. плош.;
с —концентрация геспериднна или иарингина в рабочем стандартном растворе, мг/дм3.
П р и м е ч а н и е —При необходимости определения иарингина и геспериднна в навеске массовую
долю этих веществ в продукте Х|, мг/кг. вычисляют по формуле
3