ГОСТ 10199-81 С. 4
Нанеску диметиламинобензальдегида массой 5 г, взвешенную с погрешностью не более 0.05 г,
переносят в химический стакан вместимостью 100 мл и растворяют в 50 мл соляной кислоты,
разбавленной в соотношении I : 5. К раствору приливают по каплям 20 %-ный раствор едкого натра
до появления белого густого осадка. Затем содержимое переносят в воронку Бюхнера с бумажным
фильтром, фильтруют при вакууме и промывают водой до нейтральной pH.
Осадок с фильтром высушивают в эксикаторе до постоянной массы.
Прнготовленне раствора диметиламинобензальдеп
1
да
500 мг вещества помешают в мерную колбу вместимостью 25 мл, приливают 10 мл этилового
спирта, 2,5 мл концентрированной соляной кислоты, доводят объем в колбе спиртом до метки и
перемешивают. Раствор готовят в день анализа.
Пробу испытуемого продукта массой 100 г измельчают налабораторной мельницеи просеивают
через сито с отверстиями диаметром 1 мм. При получении на сите остатка в виде частиц пленок в
количестве не более 4 % его измельчают ножницами, прибавляют к отсеянной части продукта и
пробу тщательно перемешивают.
Посгроение калибровочного графика
Берут 7 стеклянных пробирок, в которые вливают соответственно порядковому номеру 1, 2. 3.
4, 5. 6 и 7 мл раствора карбамида концентрацией 1 мг/мл. В пробирки в порядке установленной
очередности добавляют 9, 8, 7, 6, 5. 4. 3 мл дистиллированной воды. В результате
достигается концентрация карбамида 0,1; 0,2; 0.3; 0,4; 0,5; 0.6 и 0.7 мг/мл. В каждую пробирку
приливают по 1 мл раствора диметиламинобензальдегида, перемешивают и через 2 мин измеряют
оптическую плотность окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра с синим
светофильтром (длина ванны 400 нм) в кюветах с шириной рабочей грани 20 мм и сравнивают
с раствором, приготовленным без карбамида (10 мл дистиллированной воды и I мл раствора
диметиламинобен зальдегида). На основании известных концентраций карбамида и
соответствующих им полученных величин оптической плотности строят калибровочный график.
3.12.1.3. Проведение испытании
25 г измельченного комбикорма помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл (Г), прили
вают 300 мл дистиллированной воды и встряхивают на качалке в течение 5 мин. Затем доводят в
колбе объем дистиллированной водой до метки и перемешивают.
20 мл (Г,) экстракта комбикорма переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, приливают
по 0,5 мл растворов желтой кровяной соли и уксуснокислого цинка, доводят объем в катбе
дистиллированной водой до метки и перемешивают (Г,). После этого содержимое фильтруют
через бумажный складчатый фильтр, на который предварительно помещают 1 г активированного
угля.
К 10 мл фильтра прибавляют 1 мл раствора диметиламинобензальдегида. перемешивают и
через 2 мин колориметрируют так же, как и при построении калибровочного графика. По получен
ной величине оптической плотности испытуемого раствора с помощью калибровочного графика
находят концентрацию карбамида.
3.12.1.4. Обработкарезультатов
Массовую долю карбамида (X) в процентах вычисляют по формуле
С
■
У
■
V2
-100
X =-
т • И, • 1000 • V,*
где С — количество карбамида, найденное по калибровочному графику, мг;
V— объем экстракта, мл;
Vx— объем экстракта, взятый на анализ, мл;
V2— объем экстракта, взятого на анализ после разведения, мл;
т — масса навески, г;
100 — коэффициент пересчета в проценты;
1000 — коэффициент пересчета в мг/г;
— объем фильтрата.
3.12.2. Уреазныи метод
Метод основан на экстракции карбамида водой, гидролизе его ферментом уреазой, содержа
щейся в семенах сои, и последующем титровании соляной кислотой.
105