Стр. 5 ГОСТ 25583— 83
цифи’ческое гранулирование цитоплазмы клетки. Разведение сыво
ротки учитываютпри вычислении индекса нейтрализации.Для
каждого разведениявируса и смеси вирусас сывороткой берут
по четыре пробирки. Разведения вируса и смеси вируса с сыво
роткой вносят в каждую пробирку в объеме 0,1 см3, адсорбируют
в течение 30—40 мин при комнатной температуре, а затем добав
ляют поддерживающую среду в объеме 0,9 см3, содержащую 2,5%
телячьей сыворотки, и инкубируют при 37,5°С в течение 6 сут. ’
2.2.4.2
.
Обработка результатов
Учет реакции ведут по цитопатическому действию вируса. Раз
ница логарифмов титра вируса и смеси вируса с сывороткой счи
тается индексом нейтрализации. Результат реакции определяют по
п. 2.2.3.2.
2.2.5.Проведениеисследованияв реакциипреципитации в
агаровом геле
2.2.5.1. Очищенный агар от 1,1 до 1,5%, содержащий 8% хло
ристого натрия и имеющий pH 7,6—7,8, наливают в чашки Петри.
Штампом делают лунки (углубления) диаметром 4 или 6 мм на
расстоянии 4 мм друг от друга. На дно каждой лунки наносят кап
лю расплавленного агара; антиген получают из гомогенезирозан-
ных хориоаллантоисных оболочек (ХАО)погибших куриных эм
брионов, инокулированных адаптированным к ним штаммом. Вы
бирают только те ХАО, которые показывают четкую и сильно вы
раженную реакцию с преципитирующей специфической антисыво
роткой; сыворотки — контрольные(положительная и отрицатель
ная) и испытуемые должны быть в нативном состоянии и не инак
тивированными. Чашки Петри выдерживают во влажной камере
при температуре 37°С или при комнатной температуре в течение
24—72 ч.
Кроме контрольной положительной и отрицательной сывороток,
в РПАГ ставят и контроль на антиген, изготовленный из гомоге
ната ХАО незараженных куриных эмбрионов того же самого
воз раста.
2.2.5.2. Обработка результатов
Появление линии преципитациимежду антигеном и сыворот
ками свидетельствует о положительном результате.
Небольшойпроцент положительныхрезультатов в реакции
преципитации в агаровом геле выявляют в том случае, если зара
жение птиц происходило за 2—7 недель до исследования.
Если устанавливают большой процент преципитирующих сы
вороток, стадо птицы считают неблагополучным по инфекционно му
бронхиту.
20