ГОСТ 25586— 83 Стр. 9
ла не менее 2 мм.
й).
2.4.3. Проведение исследования
Для постановки реакциипреципитации агаровую среду рас
плавляют при температуре 60—65°С,разливают в чашки Петри
или наносятна предметные стекла, чтобы толщина слоя агара
бы
В агаровой пластинке делают шесть лунок в виде шестиуголь
ника и одну лунку в центре. Шесть лунок диаметром 4 мм долж
ны располагаться по окружности на расстоянии 2 мм друг от дру
га и от края центральной лунки.
Во избежание подтекания антигена и сыворотки под агар-дно
лунок осторожно расплавляют или в каждую лунку вносят
небольшое количество расплавленного агара. В двухслойном ага
ре лунки пробивают только в верхнем слое.
Для выявления специфических антителв сыворотке крови в
центральную лункувносят специфический вирусный антиген, а
впериферические лунки — испытуемыесыворотки. Специфичес
кий антиген готовят из перьевых фолликулов птиц, эксперимен
тально инфицированных вирусом болезни Марека.
Контролями служат:
специфический вирусный антиген + специфическая сыворотка;
специфическийвирусныйантиген 4- контрольная сыворотка
(отрицательная);
специфический вирусный антиген -Ь физиологический раствор.
Для выявления вирусного антигена в центральную лунку вно
сят специфическую сыворотку, а в периферические лунки испы
туемый материал. При этом необходимо использовать экстракт
из перьев фолликулов спонтаннозаболевшей птицы или клеточ*
ную культуру, зараженную вирусом.
Контролями служат:
специфическая сыворотка + специфический вирусный антиген;
специфическая сыворотка + контрольный антиген (отрицатель
ны
После заполнения лунок компонентамизакрытые чашки или
предметные стекла помещают во влажную камеру или термостат
при температуре 37°С.
Результаты учитывают через 24 и 48 ч.Конечный учет про
водят через 72 ч.
2.4.4. Обработка результатов
Реакцию на чашках Петри и предметных стеклах учитывают
в косонаправленном пучке света на темном фоне. Сначала реги
стрируют контрольные линии преципитации, которые должны по
являться между лунками со специфическим антигеном и специ
фической сывороткой.Пробы с линиями преципитации считаюг
положительными.
29