Стр. 8 ГОСТ 25586— 83
2.4. Серологический метод
в обнаружении антител к виру
этого вируса в реакции преци
Сущность метода заключается
су болезни Марека или антигена
питации в агаровом геле.
2.4.1. Аппаратура, реактивы и материалы
ическираствор) с pH 7 2—7,4;
В ти условиях среду хранят до 14 суто ;
1:8 до 1:16;
титром т 1:8 д 1:16;
Для проведения исследования применяют:
термостат с температурой нагрева 37—38°С;
чашки Петри по ГОСТ 25336—82;
стекла предметные по ГОСТ 9284—75;
лог
натрия
й
хлорид по ГОСТ
,
4233—77, 0,87%-ный раствор (физио
гель 1%-ного агара; готовят следующим образом: берут 10 г
высококачественногоочищенного агара, 80 г хлорида натрия и
доводят дистиллированной водой до 1000 см3.Смесь автоклави
руют при 1 атм в течение 30 мин, фильтруют через два слоя мап-ли
и доводят pH смеси при помощи 10%-ного раствора гидроокиси
натрия до 7,2—7,4. Среду консервируют мертиолатом (0,01% к
общему объему), разливаютв колбы, или стеклянные бутылки
по
э
50
х
или .100 см3, охлаждают и хранят
к
при температуре 2—4°С.
от
специфический тест-антиген вируса болезни Марека с титром
специфическуюпреципитирующуютест-сыворотку к вирусу
болезни
о
Марека
о
(например, от спонтанно заболевшей птицы) Ь
контрольный антиген отрицательный;
контрольную сыворотку отрицательную;
среду для выращивания клеток;
среду поддерживающую.
2.4.2. Подготовка к исследованию
Для исследования в реакции преципитации в агаровом геле из
эпителей фолликулов перьев готовят суспензию следующим об
разом: с наружной поверхности бедра’и крыльев убитой птицы
выщипывают по 10—15 перьев. Образовательная ткань внутри
фолликулов перьев обязательно должна быть сохранена. Фолли
кулы перьев с эпителиальными клетками используют для полу?
чения суспензии и из них готовят экстракт для серологического
исследования (индикация антигена). Очины перьев измельчают
на кусочки,которые затем растираютв гомогенизаторе или в
ступке со стерильным песком или замораживают в жидком азо
те. Затем их заливают физиологическим раствором в соотношении
1:10 и экстрагируют в течение 24 ч при 4°С. Надосадочную жид
кость экстракта исследуют в реакции преципитации.
28