ГОСТ 33607-2015
натрия активной кислотностью 5 2 ед. pH, и тщательно перемешивают.Добавляют
0,250см3 бета-глкжорнидазы, перемешиваюти ставят на водянуюбанюпри
температуре 37 °С на 16 ч.
Гидролизат центрифугируют 5 мин с центробежным ускорением 4000
д
.
Далее
4 см3 супернатанта отбирают в центрифужную пробирку вместимостью 15 см3,
добавляют 5 см3раствора хлорной кислоты, доводят pH концентрированной хлорной
кислотой до (1 ± 0 3) ед. pH. Затем пробу центрифугирут в течение 10 мин.
Супернатант переносят в пробирку вместимостью 50 см3,доводя pH до 11 раствором
гидроксида натрия. В пробирку добавляют 10 см3 раствора хлорида натрия и 10 см3
смеси изопропилового спирта с этилацетатом, перемешивают, центрифугируют 5 мин.
Органический слой изопропилового спирта с этилацетатом переносят в круглодонную
колбу.Экстракциюповторяют дважды, экстракты обьединяюти упаривают на
роторном испарителе при 40 °С. Сухой остаток растворяют в 5 см3 раствора ацетата
натрия активной кислотностью 5,2 ед. pH, и проводят процедуру твердофазной
экстракции (ТФЭ).
832 Очистка пробы методом ТФЭ
Картриджи ТФЭ предварительно активируют, пропуская 3 см3 метанола, затем
3 см3 дистиллированной воды. Анализируемый раствор наносят на картридж со
скоростью 1 см3/мин. Картридж промывают, пропуская 2 см3дистиллированной воды и
2 см3 раствора 2 %-ной муравьиной кислоты, отбрасывая смывы. Аналиты элюируют
5 см3 5 %-ного раствора аммиака в метаноле со скоростью 1 см3/мин и переносят в
круглодоиную колбу. Растворупаривают досухана роторномиспарителепри
температуре 40 °С. К сухому остатку приливают 1 см3 смеси 1 %-ной муравьиной
кислоты с метанолом. Ставят на 5 мин на ультразвуковую баню до полного
растворения остатка. Раствор пропускают через мембранный фильтр с диаметром пор
0,45 мкмв хроматографическую виалу вместимостью2 см3для ВЭЖХ-МС/МС анализа.
9 Проведение измерений
9.1 Хроматографические условия измерений
Условия проведения ВЭЖХ-МС/МС анализа подбираются в зависимости от вида
применяемого жидкостного хроматографа, масс-спекгрометрического детектораи
хроматографической колонки.
В качестве примера могут быть приведены следующие условия определения
бета-агонистов,выполненныенасистемеВЭЖХ-МС/МСс хроматографической
колонкой С18,4,6 х 50 мм, 1,8 мкм.
9