ГОСТ 33601—2015
5.3 Подготовка к проведению измерений
5.3.1 Необходимое количество микропробирок со специфическими белковыми рецепторами
тест-набора (5.2.1) выдерживают при температуре (20
±
5) °С в течение 20 мин. После выдержки
микропробирки со специфическими белковыми рецепторами тест-набора (5.2.1) помещают в
термостат и термостатируют при температуре (40
±
1) °С в течение 10 мин.
5.3.2 Восстановление контрольных растворов «Положительный стандарт» и «Отрицательный
стандарт» проводят следующим образом. Во флаконы, содержащие смеси для приготовления
контрольных растворов (5.2.1), с помощью пипетки вносят по 1 см3дистиллированной воды. Флаконы
закрывают крышками и оставляют на 1.5 мин. Затем содержимое флаконов аккуратно перемешивают до
образования однородного раствора. Восстановленные контрольные растворы «Положительный
стандарт» и «Отрицательный стандарт» используют свежеприготовленными.
5.3.3 Подготовка проб
Непосредственно перед измерениями проводят дополнительную подготовку проб: в стакан
вместимостью 250 см3 помещают 100—150 см3 продукта, подготовленного по разделу 3. пробу
нагревают до температуры (35 ♦ 2) °С. постоянно перемешивая, и охлаждают до температуры (20
±
2) °С.
5.3.4 Восстановление сухого молока проводят по ГОСТ 29245. выдерживают время для
набухания белка не менее 30 мин при комнатной температуре и далее пробу нагревают до
температуры (35
±
2 ) Х и охлаждают до температуры (20
±
2) "С.
5.4 Проведение измерений
5.4.1 Проводят два параллельных определения. В каждую микропробирку, подготовленную по
5.3.1, пипеткой с индивидуальным стерильным наконечником (5.2.1) вносят по 0.2 см3 пробы
продукта, подготовленной по 5.3.3 и 5.3.4. Содержимое микропробирок быстро перемешивают,
используя пипетку, наполняя и сливая ее содержимое обратно не менее пяти раз для получения
однородного раствора.
5.4.2 Микропробирки помещают в термостат и выдерживают при температуре (40
±
1) аС в
течение 3 мин. Затем в каждую микропробирку, не вынимая ее из термостата, помещают по одной
индикаторной полоске (5.2.1). Микропробирки с индикаторными полосками выдерживают в
термостате при температуре (40
±
1) °С в течение 7 мин.
По истечении этого времени индикаторные полоски извлекают из микропробирок, помещают на
лист фильтровальной бумаги, отделяют от нее пористый фильтр и считывают результат не позднее
чем через 2 мин, так как при подсушивании индикаторных полосок интенсивность окрашивания
увеличивается, что может привести к ошибочному результату.
5.4.3 Параллельно проводят контрольное испытание, используя контрольные растворы,
подготовленные по 5.3.2, в соответствии с 5.4.1—5.4.2. При этом в одну микропробирку вносят 0.2 см3
раствора «Положительный стандарт», в другую — 0.2 см3раствора «Отрицательный стандарт».
5.5 Обработка результатов
5.5.1Обработку результатов проводят, сравнивая интенсивность окрашивания зоны
определения афлатоксина М, в красный цвет с контрольной линией контрольной зоны, проявившихся
на индикаторной полоске после проведения измерений (приложение А. рисунок А.1). Результат
считывают непосредственно после последнего термостатирования, но не позднее чем через 2 мин.
Зона определения афлатоксина М, на индикаторной полоске расположена под контрольной линией.
Зона в верхней части индикаторной полоски является контрольной. Если после проведения
определения по 5.4.2 или 5.4.3 окрашивания контрольной зоны не произошло, то определение
афлатоксина М, в пробе повторяют с новым тест-набором, так как результат считается
недействительным.
В случае если интенсивность окрашивания зоны определения афлатоксина М, более яркая,
чем контрольная, проба считается отрицательной. Если интенсивность окрашивания зоны
определения афлатоксина Mi совпадает или менее яркая, чем контрольная, либо окрашивание зоны
определения отсутствует, то проба считается положительной, что свидетельствует о наличии
афлатоксина М, в анализируемом продукте в количестве, равном или большем, чем предел
обнаружения.
3