ГОСТ 33427—2015
П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылоч
ных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального
агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или ежегодному информационному
указа телю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по
выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный
стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим
(изменен ным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана
ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Терминыиопределения
В настоящем стандартеприменен следующийтермин ссоответствующим определением:
3.1 трипсинингибирующая активность; ТИА: Отношение массы трипсина, ингибируемого по
методике, описанной в настоящем стандарте, к массенавески пробы.
П р и м е ч а н и е — Трипсинингибирующую активность выражают в миллиграммах на грамм.
4 Сущность метода
Сущностьметода заключаетсявэкстракции ингибиторатрипсина изнавескипри 9.5ед. pH. инги
бировании активности трипсина, используя в качестве субстрата бензоил-1_-аргинин-р-нитроанилид,
определении оставшейся активности трипсина путем спектрофотометрического измерения высвобож
денногор-нитроанилина ивычислении трипсинингибирующейактивности.
5 Реактивы ирастворы
5.1 Реактивы
5.1.1 Вода дистиллированная по ГОСТ6709.
5.1.2 Натрия гидроокись лоГОСТ4328.
5.1.3 Кислота соляная по ГОСТ3118.
5.1.4 Кислота уксуснаяледянаяпо ГОСТ61.
5.1.5 Кальций хлористый двухводный. СаС12 2НгО. с массовой долей основного вещества но
менее 99.0%.
5.1.6 Трилсин крупного рогатого скота.
5.1.7 Бензоил-1_-аргинии-р-нитроанилид (L-BAPA) с содержанием основного вещества не менее
99.0%.
5.1.8 Трис-(гидроксиметил) аминометан (Трис) с содержанием ос/ювного вещества но менее
99.0%.
5.1.9 Диметилсульфоксид(ДМСО) с содержанием основного веществане менее 99.5 %.
П р и м е н е н и е — Допускается использование реактивов аналогичной или более высокой квалифика
ции. изготовленных ло другой нормативной документации.
5.2Приготовление растворов
5.2.1 Приготовление раствора гидроокиси натрия c(NaOH) = 0,01 моль/дм3
В мернойколбе вместимостью 1000 см3растворяют 0.4 ггидроокиси натрия и доводят объем
раствора до метки дистиллированной водой.
5.2.2 Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) = 6 моль1дм*
Растворготовятсмешиванием солянойкислотыи дистиллированнойводы всоотношении 1:1
по объему.
Срокхраненияраствора не ограничен.
5.2.3 Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) = 1 моль/дм3
В мерную колбу вместимостью 1000 ал3 вносят 83 см3концентрированной соляной кислоты и
доводят объемраствора до метки дистиллированной водой (см. 5.1.1).
Срокхранениярастворано ограничен.
5.2.4 Приготовление раствора соляной кислоты c(HCI) = 0,1 моль/дм3
В мерную колбу вместимостью 1000см3 пипеткой вносят 8.3 с/г3концентрированной соляной
кислоты и доводят объемраствора до метки дистиллированнойводой (см. 5.1.1).
2