ГОСТ Р 56058—2014
5 Оборудование, материалы и реагенты
5.1 Требования к оборудованию - по ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025.
5.2 При проведении испытаний применяют оборудование и материалы по ГОСТ 31719. а также
следующие:
- бокс ламинарный II класса биологической безопасности;
- отсасыватель вакуумный медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидко
сти;
- микропробирки одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся или плотно закрывающие
ся вместимостью 1.5 см3;
- микропробирки одноразовые полипропиленовые вместимостью 0.2 см3;
- ПЦР-бокс;
- прибор для проведения ПЦР’;
- халаты медицинские.
Допускается использование другого оборудования и материалов с техническими характеристи
ками не хуже указанных выше.
5.3 При проведения испытаний применяют реагенты для экстракции ДНК по ГОСТ Р 55576. а
также следующие реагенты, праймеры и зонды для проведения ПЦР и амплификации.
5.3.1 Реагенты:
- вода деионизованная;
- ПЦР-буфер;
- раствор дезоксинуклеотидтрифосфатов (дНТФ) 10’ (10-кратная смесь четырех компонентов с
концентрацией каждого компонента 1,76 * 10 3моль/дмэ);
- Гад-полимераза термостабильная.
- образцы стандартные состава ГМ сои и ГМ кукурузы, содержащие от0.1 % до 5.0 % линий
ГМ сои и ГМ кукурузы’.
Допускается использование других реактивов с техническими характеристиками не хуже ука
занных выше.
5.3.2 Праймеры (смесь олигонуклеотидов) и зонды (меченные флуоресцентными красителями
FAM и R6G):
5.3.2.1 Для определения ГМ сои линии 40-3-2:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5’- GCC ATG TTG ТТА ATT TGT GCC АТ 3’;
2) праймер 2: 5 - GAA GTT CAT ТТС ATT TGG AGA GGA С 3*;
3) зонд: 5’- FAM-CTT GAA AGA ТСТ GCT AGA GTC AGC TTG ТСА GCG - BHQ1-3*;
б) специфичные гену лектина (/ес1):
1) праймер 1: 5*-ТСС ACC ССС АТС САС ATT Т -3’;
2) праймер 2: 5‘- GGC АТА GAA GGT GAA GTT GAA GGA-3’;
3) зонд: 5’ - R6G-AAC CGG TAG CGT TGC CAG СТТ CG -BHQ1 -3’;
5.3.2.2 Для определения ГМ сои линии А2704-12:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1:5 - GCA AAA AAG CGG ТТА GCT ССТ-3’;
2) праймер 2:5*- ATT CAG GCT GCG CAA CTG TT-3’;
3) зонд: 5’- FAM-CGG ТСС TCC GAT CGC CCT TCC-BHQ1-3*;
б) специфичные гену лектина (/ec2):
1) праймер 1: 5 -CAC СТТ TCT CGC ACC AAT TGA CA-3’;
2) праймер 2: 5*-ТСА AAC ТСА АСА GCG ACG AC-3’;
3) зонд: 5 -R6G-CCA CAA АСА CAT GCA GGT TAT CTT GG -BHQ1 -3\
5.3.2.3 Для определения ГМ сои линии А5547-127:
а) специфичные целевой последовательности:
1) праймер 1: 5 - GCT ATT TGG TGG CAT TTT ТСС А 3*;
2) праймер 2: 5*- САС TGC GGC CAA СТТ ACT ТСТ 3*;
3) зонд: 5’- FAM-CC GCA ATG ТСА ТАС CGT CAT CGT TGT-BHQ1-3’;
б) специфичные гену лектина (/есЗ):
1) праймер 1:5*- CCT ТСТ CGC ACC AAT TGA СА -3*;
2) праймер 2: 5*- ТСА ААС ТСА АСА GCG ACG АС -3*;
Прибор для проведения ПЦР «Rotor-Geneп 2000/3000/6000 {
к
Corbett Research», Австралия). Данная ин
формация является рекомендуемой и приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
Стандартные образцы состава ГМ сои и ГМ кукурузы «Сигма Апдрич».ССМ от JRC, IRMM. Данная ин
формация является рекомендуемой и приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
2