ГОСТ Р 55275-2012
- культура клеток ВНК-21;
- питательная среда ДМЕМ (модифицированная среда Игла);
- эмбриональная сыворотка крови крупного рогатого скота для культур
клеток;
- планшеты полистироловые 96-луночные для культур клеток;
- СОг-инкубатор;
- пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;
-ацетон по ГОСТ 2603;
- пипетки вместимостью 1,0; 2,0 и 10,0 см3 по ГОСТ 29230;
- пипетки автоматические с наконечниками вместимостью 0,02 - 0,2 см3;
- раствор натрия хлорида изотонический 0,9 %-ный по [2];
- флуоресцирующий антирабический глобулин;
- люминесцентный инвертированный микроскоп по ГОСТ 8074.
1
.
2.22 Подготовка к испытанию
а) Подготовка планшет
Для проведения испытания в лунки 96-луночного планшета вносят
суспензию культуры клеток в питательной среде с добавлением 10 %-ной
эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота в объеме 0,1 см3с
концентрацией (1 —2) х 105 клеток/см3. Планшеты накрывают крышкой и
помещают в С02-инкубатор при температуре 37 °С и 5 %-ным содержанием
С02на 18-24 ч. После инкубации планшеты просматривают в инвертирован
ном микроскопе, используя для дальнейшей работы только те, в лунках кото
рых образовался ровный монослой клеток.
б) Подготовка образцов вакцины
Три брикета размораживают при комнатной температуре, вынимают из
них блистеры (пакеты), из которых стерильно извлекают вирусную суспен
зию и объединяют ее в одной емкости. Из смеси готовят последовательные
десятикратные разведения от 10 1до 10’7, на питательной среде ДМЕМ, ис
пользуя для каждого разведения отдельную пипетку.
11