ГОСТ Р 51425-99
2
В
S
D
С
я
а
А
ва
«
2013050
Рисунок 1—Нанесение растворов и проявление
хроматограммы
Высушивают пластину струей воздуха или
азотом.
Полученные пятна должны быть диамет
ром около 5 мм.
7.5.2 Проявление (рисунок 1)
Проявляют хроматограмму в направле
нии 1, используя смесь толуола, этнлацетата и
муравьиной кислоты в объемном соотношении
6 : 3 : 1 слоем в 10 мм в насыщенной камере для
хроматографирования, защищенной от воздей
ствия света, до тех пор. пока фронт растворителя
не достигнет линии отметки. Вынимают пласти
ну из камеры и дают подсохнуть окало 15 мин
при температуре окружающей среды в защищен
ном от света месте.
П ри мс ча н нс —После проявления в на
правлении / хроматограмму просматривают вультра
фиолетовом свете с длиной валим 253 нм, и возмож
ные пятна зеараленона отмечают карандашом (пятно
в точке В свидетельствует о наличии зеараленона).
Далее проводят хроматографирование в направлении 2, используя для этой цели смесь хлоро
форма и этанола в объемном соотношении 95 : 5 слоем 10 мм в ненасыщенной камере в защищен ном
от света месте, пока фронт растворителя не достигнет линии отметки. Вынимают пластину из камеры и
подсушивают ее при температуре окружающей среды в защищенном от света месте.
7.6 Определение
Для определения используют два способа: визуальный или флуороденситомегрическое изме
рение. Последний способ используют при наличии аппарата.
7.6.1 Визуальное определение
Определяют количество зеараленона в экстракте путем сравнения интенсивности флуоресцен
ции в ультрафиолетовом свете пятна экстракта испытуемой пробы с интенсивностью свечения пятен
С, D и £’стандартного раствора, поместив пластину на расстоянии К)см от ультрафиолетовой лампы.
При необходимости осуществляют интерполирование полученных данных.
Если интенсивность флуоресценции пятна экстракта испытуемой пробы объемом 25 мкдм3
превышает интенсивность свечения пятна стандартного раствора зеараленона объемом 15 мкдм3, то
наносят меньший объем экстракта в точку А или разбавляют экстракт смесью бензола с ацетонит
рилом и повторяют тонкослойное хроматографирование, начиная с 7.5.
7.6.2 Флуороденситометрическое определение
Измеряют интенсивность флуоресценции пятен флуороденситометром, например на волне
возбуждения в 313 нм и волне эмиссии в 443 нм (максимальная эмиссия при 470 нм).
Определяют содержание зеараленона в экстракте, нанесенном на пластину, путем сравнения
интенсивности флуоресценции пятна экстракта с интенсивностью свечения пятен С, D и Е стан
дартного раствора.
7.7 Проверочное испытание на присутствие зеараленона
Напыляют на пластину, подготовленную по 7.5 бнедназотированиый бензидин. Зеараленон
дает яркое кирпично-красное пятно при температуре окружающей среды, выцветающее после
15-минутной экспозиции на воздухе.
8 Обработка результатов
«У.1 Визуашюе onftede.ieiiue
Содержание зеараленона X, мкг/кг, рассчитывают по формуле
< 2 >
где с — массовая концентрация зеараленона в стандартном растворе, мкг/см3;
4