ГОСТ 31955—2012
8.3 Неселективный трилтон-соевый агар (ТСА)
Состав:
казеин трипсиновой ферментации — 15 г;
соевый пептон — 5 г;
натрий хлористый — 5 г;
агар (а форме порошка ипи хлопьев) — 15—25 г;
дистиллированная вода — до
1000
мл.
П р и м е ч а н и е — Массу агара выбирают в зависимости от его свойств к гелеобразоеанию.
Указанные ингредиенты растворяют при нагревании в дистиллированной воде. Устанавливают значение pH
таким образом, чтобы после стерилизации оно было равко(7,2 ± 0.1) при температуре25 аС. Разливают получен
ную среду в емкости вместимостью не более 250 мл и стерилизуют а течение 15 мин при температуре (121 ± 3 ) °С.
Затем среду охлаждают при комнатной температуре до (50 i 5) *С и разливают в чашки Петри с образованием слоя
толщиной не менее 5 мм.
П р и м е ч а н и я
1 Для оксидазного теста вместо ТСА может применяться любой неселективный агар с низким содержанием
ферментируемых углеводов.
2 Для приготовления двуслойной среды вместо ТСА может быть использован питательный агар (приго
товленный в соответствии с инструкцией изготовителя) с добавлением L-трилтофана в концентрации
1г/дм3.
В.4 Трнптон-желчный агар (ТЖА)
Состав:
триптон —
20
г;
соли желчи — 1.5 г;
агар (в форме порошка или хлопьев) — 15—25 г;
дистиллированная вода — до
1000
мп.
П р и м е ч а н и е — Массу агара выбирают в зависимости от его свойств к гелеобразоеанию.
Указанные ингредиенты растворяют при кипячении в дистиллированной воде. Устанавливают значение pH
таким образом, чтобы после стерилизации оно было равно (7.2 * 0.1) при температуре 25 ’ С. Разливают среду в
емкости вместимостью не более 250 мл и стерилизуют в течение 15 мин при температуре (121 ± 3) аС. Затем среду
охлаждают при комнатной температуре до (50 г 5) ‘ С иразливают в чашки Петри с образованием слоя толщиной не
менее 5 мм.
Чашки с двуслойной средой готовят путем заливки горячего ТСА (см. В.З) температурой (50 ± 5) *С поверх
затвердевшей среды ТЖА. разлитой в чашки, нагретые до комнатной температуры. Используют такой объем ТСА.
который образует слой толщиной около 1мм (например 2,5 мл вчашке Петри диаметром 55 мм). После затвердения
двуслойной среды, при необходимости, ее подсушивают в термостате при температуре (36 а 2) ‘ С. перевернув
чашки вверх дном. Для каждого анализа готовят свежие двуслойные среды (за 30— 60 мин до размещения мем
бранных фильтров в чашках Петри со средой).
В.5 Реактивы
В.5.1 Реактив Ковача для индольного теста (стандартный тест)
Состав:
р-диметиламинобензальдегид — 5 г;
амиловый или бутиловый спирт (не содержащий органических оснований) — 75 мл;
соляная кислота плотностью 1.18 г/мл — 25 мл.
Растворяют альдегид в спирте. Осторожнодобавляют концентрированную соляную кислоту. Реактив хранят
при температуре (5 ± 3) °С в защищенном от света месте.
П р и м е ч а н и я
1 Цвет реактива должен бытьот светло-желтого досветло-коричневого; при использовании амилового спир
та неудовлетворительного качества реактив приобретает темную окраску.
2 Приготовление реактива проводят в вытяжном шкафу. При этом необходимо использовать защитные пер
чатки и очки и избегать контакта ср-диметипаминобензальдегидом Амиловый спирт может вызывать раздражение
слизистых оболочек и головокружение.
В.5.2 Реактив для индольного теста (ускоренный тест)
Состав:
р-диметиламинобензальдегид — 0.5 г;
соляная кислота молярой концентрации
1
мопь/п —
100
мл.
10