ГОСТ Р 53985—2010
9.2.2 Инокуляция и инкубация
9.2.2.1 Берут три пробирки для каждой серии разбавлений. Допускается для некоторых кормов
и/или всякий раз. когда требуются результаты более высокойточности, инокуляция большегочисла про
бирок (например, пяти вместо трех). В этих случаяхдля вычисления методом наиболее вероятногочис ла
следует обратиться ксоответствующим таблицам в ГОСТ Р ИСО 7218.
3.2.2.2 Берут три пробирки с селективно обогащенной питательной средой двойной концентра
ции (5.3.1а)]. Используястерильную пипетку переносятвкаждуюиз трехпробирок по 10 см3анализируе
мой пробы, если исследуемый корм жидкий, или по 10 см3исходной суспензии вслучае исследования
других кормов.
9.2.2.3 Затем беруттри пробирки с селективно обогащенной питательной средой нормальной кон
центрации (5.3.1 Ь)]. Используя стерильную пипетку, переносят вкаждую из трех пробирок по 1 см3ана
лизируемой пробы, если исследуемый корм жидкий, или по 1 см3 исходной суспензии в случае
исследования других кормов.
9.2.2.4 Для каждого из последующих разбавлений продолжают действия согласно описанию в
9.2.2.3. Используют свежую стерильную пипетку для каждого разбавления. Введенную суспензию и
питательную среду тщательно перемешивают.
9.2.2.5 Пробирки с питательной средойдвойной концентрации (Э.2.2.2) выдерживают втермоста
те при температуре 30 5С или 37 °С втечение (24
а
2) ч.
9.2.2.6 Пробирки с питательной средой нормальной концентрации (9.2.2.3 иЭ.2.2.4) выдерживают
втермостате при температуре 30 °С или 37 °С втечение (24
а
2) ч. или. если наэтой стадии необнаружи
вается ниобразование пузырьков газа, ни помутнение, предотвращающее обнаружение формирования
газа, инкубацию продолжают дополнительно втечение (24
а
2 )
ч
.
9.2.3 Подтверждение (см. приложениеА. рисунок А.З)
9.2.3.1 Из каждой пробирки, прошедшей инкубацию согласно 9.2.2.5. петлей берут суспензию и
вводят ее в пробирку с подтверждающей питательной средой (5.4). Выдерживают в термостате (6.2),
установленном на температуру 30 °С или 37 "С (по договоренности), в течение (24 * 2) ч. или. если на
этой стадии образование пузырьков газа не наблюдается, инкубацию продолжают дополнительно в
течение (24 ±2)ч.
9.2.3.2 Процедуру, описанную в 9.2.3.1, выполняют с пробирками, прошедшими инкубацию
согласно Э.2.2.6 и показывающими образование пузырьков газа или помутнение, предотвращающее
обнаружение формирования газа, когда один из этих двух признаков наблюдается впервые, т.е. через
(24 ± 2 )чили(48
а
2 )
ч
.
9.2.4 Интерпретация (см. приложениеА. рисунокА.2)
Для каждого разбавления подсчитывают общее количество пробирок, в которых подтверждается
образование пузырьков газа согласно 9.2.3 (положительные пробирки) через (24
1
2) ч или (48 ♦ 2) ч
(если инкубация продлевалась еще на сутки).
10 Обработка результатов
В соответствии с результатами интерпретации (см. 9.1.4) указывают присутствие или отсутствие
колиформных бактерий ванализируемой пробе корма по ГОСТ Р ИСО 7218.
Вычисляют наиболее вероятное число из количества положительных пробирок на каждой стадии
разбавления по ГОСТ Р ИСО 7218.
11 Сходимость результатов исследования
Установлено, чтоприиспользовании метода наиболее вероятного числа (НВЧ) может иметь место
значительный разброс результатов. Доверительные пределы приведены в ГОСТ Р ИСО 7218.
12 Требования безопасности
Тробованиякбезопасности выполнения работиквалификации оператора— поГОСТ Р ИСО 7218.
5