ГОСТ Р 53985—2010
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены термины и определения по ГОСТ Р 52816.
4 Обнаружение колиформных бактерий и определение количества
методом наиболее вероятного числа (НВЧ)
Сущность метода — по ГОСТ Р 52816.
4.1 Метод обнаружения колиформных бактерий
4.1.1 Впробирку с селективно обогащенной питательной средой вносят около 1 гкорма, пробирку
помещают втермостатдля инкубирования при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности)втече
ние24 ч или 48 ч.
4.1.2 Пробирку, после выращивания по 4.1.1. проверяют на наличие помутнения и/или образова
ния газа. Затем из пробирки, вкоторойустановлено наличиепомутнения и/или образования газа, вносят
в другую пробирку с селективно обогащенной питательной средой около 1 см3 суспензии и проводят
повторное выращиваниемикроорганизмов притемпературе 30 °С или 37 °С (по договоренности) втече
ние24 ч или 48 ч.
4.1.3 Присутствие колиформных бактерий подтверждают в случае, если помутнение и/или обра
зование газа замечено после осмотра пробирки, полученной по4.1.2
4.2Метод НВЧ — определение количества колиформных бактерий
4.2.1 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой двойной концентра
ции вводят определенное количество анализируемой пробы, если исходный корм являетсяжидким, или
определенное количество исходной суспензии вслучае испытания других кормов.
4.2.2 В три пробирки с селективно обогащенной жидкой питательной средой нормальной концен
трации вводят определенное количество анализируемой пробы, если исходный корм является жидким,
или определенное количество исходнойсуспензии вслучае испытания других кормов.
Затем, втакихже условиях, вдополнительные пробирки спитательной средой нормальной крепос
ти вводят десятичные разбавления анализируемой пробы или исходной суспензии.
4.2.3 Пробирки с посевами, содержащие селективно обогащенную питательную среду двойной
концентрации, выращивают при температуре 30 °С или 37 °С (по договоренности) втечение 24 ч, а про
бирки, содержащие селективно обогащенную питательную среду нормальной концентрации, инкубиру
ют 24 ч или 48 ч и после этого пробирки осматривают и отмечают образование пузырьков газа или
помутнение, предотвращающее обнаружение формирования газа.
4.2.4 Вряд пробирокс подтверждающей питательной средой вводят суспензию культур из проби
рок с селективно обогащенной питательной средой двойной концентрации исуспензию культур из про
бирок с селективно обогащенной питательной средой нормальной концентрации, в которых было
замечено образование пузырьков газа или помутнение.
4.2.5 Посевы впробиркахпо4.2.4 выращивают при температуре 30 °С или 37 °С втечение24 ч или
48 ч, иэти пробирки исследуют на формирование газа.
4.2.6 Наиболее вероятноечисло колиформных бактерий в1см3или 1гпробы корма (НВЧ) рассчи
тывают исходя изчисла из пробирок по4.2.5. показывающих формирование газа. Вэтом случае исполь
зуют таблицу установления наиболее вероятного числа.
5 Среды выращивания бактерий и разбавители
5.1 Общие положения
Качество подготовки, изготовления и оценки эффективности питательных сред для выращивания
бактерий — по ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ Р И С 011133-1 и ГОСТ Р ИСО 11133-2.
5.2 Селективно обогащенная питательная среда: LST (Триптоза лаурилсульфата)
5.2.1 Состав приведен втаблице 1
2