ГОСТ Р 52828—2007
Ацетон по ГОСТ 2603.
Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч.д.а.
Спиртизопропиловый по ГОСТ 9805.
Бензол по ГОСТ 5955.
Кислота уксусная по ГОСТ 61.
Допускается применениедругих средств измерений, вспомогательного оборудования с аналогич
ными метрологическими итехническимихарактеристиками, атакже материалов иреактивовпокачеству
не хуже вышеуказанных в разделе8.
9 Подготовка к испытанию
9.1 Подготовка анализируемой пробы к испытанию
Анализируемую пробу вина или виноматериала в объеме 10 см3набирают инъекционным шпри
цем однократного применения, соединяютшприц с концентрирующим патрономДиапак С 16М или Диа-
пак С16МТ, подготовленными по9.7. Пропускают пробучерез патрон по одной капле со скоростьюот 10
до20 капельв минуту. Затемдлядесорбцииохратоксина Ачерез патрон пропускается
1см3ацетонитри ла соскоростью от 10 до 20 капельв минуту. Элюатсобирают встакан вместимостью
25 см3. Элюат ана лизируемой пробы используют вхроматографическом анализе.
9.2 Приготовление элюента для тонкослойной хроматографии
Состав элюентадля определения охратоксинаА состоит издвух реактивов: изопропилового спир
та и водного раствора массовой долей аммиака 25 %. которые отбирают мерными пипетками в соотно
шенииобъемов 4:1.
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят мерными пипетками индивидуально для каждого
реактива 4 см3изопропилового спирта и 1см3водного раствора аммиака. Колбузакрывают стеклянной
пробкой и тщательно перемешивают.
Раствор готовят непосредственно перед его использованием
9.3 Приготовление градуировочного раствора
Для приготовления градуировочных растворов массовой концентрацией охратоксина А 1, 2, 3,
5мкг/см3ампулусостандартным образцом вскрывают, отбирают мерными пипетками 0.5,1,1,5 и2.5см3
раствора стандартного образца и вносят в четыре мерные колбы вместимостью 25 см3. Доводят объем
раствора в мерной колбе до метки растворителем, приготовленным из бензола и уксусной кислоты в
соотношении — 99:1 при температуреокружающей среды 20 X .
Значение концентрации приготовленного раствора охратоксина А С. мкг/см3, рассчитывают по
формуле
гдеА — аттестованное значение ГСО. мкг/см3:
V, — объем раствора, отмеряемый мерной пипеткой, см3;
V2 — объем мерной колбы, см3.
Градуировочные растворы хранятне более 10дней при температуре не выше 5вСв защищенном
от света месте.
9.4 Подготовка хроматографической камеры
В хроматографическую камеру вносят элюент, подготовленный по 9.2, толщина слоя которого
должна составлять4—5 мм.
В камеру помещаютдва куска фильтровальной бумаги размером 10 х 10 см. которыми закрывают
переднюю и заднюю стенки камеры, начиная с ее дна.
Камеру закрывают крышкой для насыщения объема парами элюента. Через 20—30 мин камера
готова к проведению хроматографического разделения.
9.5 Подготовка хроматографических пластин
Перед проведением анализа пластины активируют в сушильном шкафу при температуре
90 °С—100 °С в течение 1ч.
При дальнейшей подготовке пластины учитываютнаправлениехроматографирования, перпенди
кулярное к рискам-царапинам на обратной стороне подложки пластины (пленка нафольге).
Для обеспечения равномерного подъема фронта элюента перед выполнением анализа срезают
углы в нижней части пластины на6—8 мм под углом 45е.
Для повышенияточностианализа иэффективности пластин проводятихочисткуконцентрирован
ным раствором аммиака или ацетона. Дляочисткипластину помещаютивыдерживают вхроматографи-
4