ГОСТ Р 52471—2005
Т а б л и ц а 2 — Концентрации вспомогательных и рабочих растворов микотоксинов (значения десятичных лога
рифмов концентраций рабочих растворов)
Концентрация
Определяемый компонент
вспомогательною
раствора, ыкг/см3
Концентрация рабочего раствора. С. мкгГем* (lg С)
К1К2КЗ
Афлатоксин В?
Роридин А
0.010.001 (—3.0)
0,0002 (—3,7)
0.00004 (—4.4)
Охратоксин А
Стеригматоцистин
0.020.002 (—2.7)
0,0004 (—3.4)
0.00008 (—4,1)
Т-2 токсин
Зеараленон
0.10.01 (—2.0)
0.002 (—2.7)
0.0004 (—3.4)
Фумонмзин В,
1.00.1 (—1.0)
0,01 (—2.0)
0.001 (—3.0)
10.5 Заполнение ячеек 0 и КО
Внесение растворов вячейки проводятосторожно, не касаясь наконечником их дна истенок. В три
ячейки, обозначенныена контурезначками 0иКО.дозатором вливаютпо0.1 см3раствора КО.а вячейку 0
вливаютдополнительно 0,1 см3раствора Р2.
10.6 Заполнение ячеек К1, К2, КЗ, номер пробы
Дозатором отмеряютпоО, 1 см3растворовК1,К2. КЗ. рабочихрастворовэкстрактови вносятвячей
ки в соответствии с принятым размещением на контуре.
10.7 Приготовление и внесение в ячейки рабочих растворов реактива АТ
10.7.1 При определении афлатоксина В,,роридина А, стеригматоцистина. Т-2 токсина, зеарале-
нома ифумонизина В, дозатором отмеряют по 2,0 см3 раствора Р2 и вливают их в пробирки. Дозатором
отмеряют по 0.04 см3 реактива АТ, соответствующего определяемому микотоксину, вливают его в рас
твор. перемешивают, наносят маркировкуАТ.
10.7.2При определенииохратоксинаАдозатором отмеряют 1.8 см3раствора Р2 и0,2см3реактива
АНС. вливают ихв пробирку. Дозатором отмеряют0,04 см3реактиваАТ. соответствующегоохратоксину
А, вливаютего в раствор, перемешивают инаносят маркировкуАТ.
10.8 Внесение раствора АТ в ячейки
Дозатором отмеряютпо0.1 см3раствораАТ. вливаютвовсеячейки, кромеодной, обозначеннойна
контурезначком 0.
10.9 Инкубация и отмывка
Планшет аккуратно встряхивают, накрывают крышкой и выдерживают 1 ч при температуре
22 °С—25 °С. встряхивая через каждые 10—15 мин. Отмывку проводят по9.6.4.
10.10 Приготовление рабочего раствора роактива ФК и внесение в ячейки
Дозатором отмеряют4,0 см3раствора Р2 и вливают его в пробирку. Дозатором отмеряют 0,02 см3
реактива ФК. вливают его в раствор, перемешивают, наносят маркировку ФК. Дозатором отмеряют по
0,17 см3раствора ФК и вливают во всеячейки.
10.11 Инкубация и отмывка
Инкубацию иотмывку ячеекпланшета проводят по 10.9.
10.12 Приготовление рабочего раствора реактивов СУБСТРАТ и ФДА и внесение в ячейки
Дозатором отмеряют 3,2 см3воды и вливают в пробирку. Дозатором отмеряют 0.8 см3реактива
СУБСТРАТ и 0.02 см3 реактива ФДА. добавляют их в воду, перемешивают. Дозатором отмеряют по
0,17 см3полученного рабочегораствора и вливаютего в каждую ячейку.
10.13 Инкубация
Планшетнакрываюткрышкой и выдерживают45 мин в темноте при температуре22 °С—25 °С.
10.14 Остановка реакции
Дозатором отмеряют по 0.05 см3 раствора для остановки ферментативной реакции (см. 9.4.1) и
добавляют во все ячейки, планшет аккуратно встряхивают иоставляют на 10 мин при той же темпера
туре.
10.15 Выполнение измерений
Измерение оптической плотности проводят согласно инструкции к данному типу прибора. Значе
ния ОП считывают с точностью до второго десятичного знака и заносят их в журнал сначала в правую
рамкуформыдлязаписи результатов (см. 9.5.1) и затем втаблицу(см. 9.5.2). располагая всоответствии
с номерами вариантов.
8