Стр. 4 ГОСТ 17404—81
фракцию
выделен
2 Под рефереис-пренараты сыворотки локимаюг глобулниовую
белков с известной
р
биологическом активностью в единицах действия,
ную а» саниой сыво отки
3.5 4. Обработка результатов
Реакцию оценивают постепени гемолиза эритроцитов в процен
тах.
Титром сыворотки считают наибольшее ее разведение, вызыва
ющее полную задержку гемолиза эритроцитов (отсутствие гемо
лиза) с антигеном в рабочем разведении. Титр сыворотки должен
быть не ниже 1:20.
3.5.2. Подготовка к испытанию
3.5.2.1. Готовят физиологический раствор pH 6,8—7,2.
3.5.2.2. Готовят разведении испытуемой сыворотки на физиоло
гическом растворе 1:5, 1:10, 1:20, 1:40 и 1:80, контрольной сапной
сыворотки нлп референс-препарата сыворотки 1:10,негативной
сыворотки 1:5 и инактивируют н водяной бане при 58—59°С в тече
ние 30 мин.
3.5.2.3. В соответствии с требованиями ГОСТ 16446—78 на ком
племент готовят гемолитическую систему, состоящую из равных
объемов 2,5%-ной взвеси эритроцитов барана и раствора гемоли
зина в рабочем разведении. Полученную гсмсистему помещают в
водяную баню при 37*Сна 30 миндля сенсибилизации эритроцитов.
3.5.2.4. Устанавливают титр комплемента в соответствии с тре
бованиями ГОСТ 16446—78.
Для применения в реакции комплемент берут в количестве, на
два интервала большем его титра. Так, например, при титре ком
племента 0,19 его рабочая доза будет 0,25. Затем готовят 10 см1
комплемента в рабочей дозе, для чего вливают в пробирку компле
мент в объеме, равном показателю его рабочего разведения (в при
мере — 0,25 см3) и добавляют в пробирку физиологический раст
вор до общего объема жидкости 10 см3.
3.5.2.5. Готовят рабочее разведение контрольного антигена 1:100
иа физиологическом растворе.
3.5.3. Проведение испытания
Разведения сывороток, антигена и комплемента разливают в
указанной последовательности по 0,5 см3в пробирки, одновременно
ставят контрольные пробирки в соответствии с требованиями
табл. 2. В контрольные пробирки вместо недостающих компонентов
вносят по 0,5 см3физиологического раствора.
Штативы с пробиркамивстряхивают и помещают в водяную
баню при 37Х на 20 мин.
Затем в пробирки вносят гемолитическую систему в объеме по
1см3и снова помещают в баню на 20 мин.
После бани штатив с пробирками выдерживают 15—18 ч при
температуре 4—12®С.