ГОСТ 30627.5-98
Затем гидролизат охлаждают до (20±5) ’С, доводят активную кислотность до pH = 4,5 с по
мощью насыщенного раствора уксуснокислого натрия (5 —7 см3), добавляют (0.100 i 0,001) г ами-
лоризина или пектофоэтидина, взвешенного на весах 2-го класса точности, 0,5 см3 толуола,
помещают в термостат и выдерживают 14 — 16 ч при (37il) “С.
Затем гидролизат охлаждают до (25i5) "С, переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3,
доводят объем до метки дистиллированной водой и фильтруют.
Если необходимо прервать измерение на 1—2 дня. то перед доведением объема до 250 см3гид
ролизат кипятят 5 мин на водяной бане.
До проведения измерения фильтрат хранят в плотно закрытой колбе в темном месте при
(612) ‘С.
5.К) О ч и с т к а ф и л ь т р а т а
Смешивают 25 см3фильтрата, полученного по 5.9 и 25 см3изобутилового спирта, встряхивают
5 мин и разделяют слои с помощью делительной воронки. Нижний слой сливают в мерную колбу
вместимостью 25 см3и доводят объем до метки дистиллированной водой. Верхний спиртовой слой
отбрасывают. Количество проб фильтрата и стандартного раствора для проведения измерений
берут с учетом двух параллельных измерений.
5.11 О к и с л е н и е т и а м и н ав т и о х р о м
По 5 см3фильтрата отбирают в четыре колбы вместимостью 100 см3, добавляют по 2 см3эти
лового спирта и встряхивают I мин.
В две колбы добавляют по 1,2 см3 окислительной смеси, в две другие —по 1,2 см3 водного
раствора гидроокиси натрия массовой концентрации 0,3 г/см3(холостая проба), встряхивают 2 мин.
Во все четыре колбы добавляют по 13 см3изобутилового спирта, встряхивают 3 мин, ставят в
темное место на 10 мин и разделяют слои в делительной воронке.
Нижний слой отбрасывают, к верхнему приливают 2 см3 этилового спирта для осветления и
переносят в конические колбы.
Окисление тиамина в тиохром проводят и в рабочем растворе витамина В, (стандарт). В четы
ре колбы отбирают по 1 см3 рабочего раствора витамина В,, добавляют по 4 см3дистиллирован
ной воды и далее повторяют операции, как при окислении фильтрата.
6 Проведение измерения
Интенсивность флюоресценции тиохрома измеряют на флюорометре со светофильтрами, ис
пользуемыми для витамина В,, имеющими максимум пропускания в области от 320 до 390 нм
(В|-первнчный) и от 400 до 580 нм (В,-вторичный), начиная с проб стандартного раствора.
Интервал определяемых концентраций тиамина составляет от 0,1 до 0.4 мкг/см3раствора, по
ступающего на измерение флюоресценции.
7 Обработка результатов измерения
Массовую долю витамина В, (тиамина) X. млн-1, вычисляют по формуле
д . _
(А - At)т У У2
(
А; - A]t т
1
V
|
Уу
где А — среднеарифметическое значениеиз показаний флюорометрадля анализируемогообразца;
А, — среднеарифметическое значение из показаний флюорометра для холостой пробы к анали
зируемому образцу;
т — масса тиамина в I см3 рабочего раствора, мкг;
V— общий объем гидролизата, см3;
V2— объем гидролизата, взятый на очистку от примесей, см3;
Л2— среднеарифметическое значение из показаний флюорометра для стандартного раствора
тиамина;
А3 — среднеарифметическое значение из показаний флюорометра для холостой пробы к стан
дартному образцу;
/м, — масса продукта, взятая дзя анализа, г;
К, — объем анализируемого раствора, взятый дтя окисления тиамина в тиохром. см3;
У} — объем после стадии очистки фильтрата, см3.
4