ГОСТ 27146—8*
С. 7
антиген бруцеллезный для РА, РСК (РДСК);
комплемент для РСК;
сыворотку гемолитическую для РСК;
эритроциты барана, 3—4%-нуювзвесьвфизиологическом
растворе;
физиологический раствор. pH 7,0—7,2.
2.4.2. Проведение испытания
Определение активности, специфичности, гемотоксичносги и
антикомплементарных свойств антигена проводят в РДСК по
табл. 2 н 3.
Для испытания в РДСКиспытуемыйантигенразводят
физиологическим растворо?* в соотношения1:50, 1:100, 1:150,
1:200, 1:250, 1:300, 1:350, 1:400; полнглобулин или рефедент-
ную овисную сыворотку — в разведении 1:10; S —бруцеллезую
сыворотку —в разведении 1:5 и 1:10; две нормальные сывфот-
ки крови баранов разных серий — в разведении 1:5.
Контрольный овисный и бруцеллезный антигены используэт в
рабочих титрах.
Комплемент разводят физиологическим раствором 1:20— :30
в зависимости от титра.
Гемолитическую систему готовят из равных объемов взесн
эритроцитов барана в физиологическом растворе (из осадкаэри
троцитов. отмытых 2—3 раза центрифугированием с частотойвра-
щения 2500—3000 мин-1 в течение 10—12 мин) и разведени ге
молитической сыворотки в утроенном-учетверенном титре. Gipe-
деление рабочего титра гемолитической системы для’РДСКлро-
водят по табл. 4.
При испытании антигенана антикомплементарность
в
б
сто
сывороток вносят равный объем антигена в том же разведчни,
а при испытании на гсмотоксическне свойства фнзиологичским
раствором заменяют комплемент и сыворотку’.
Реакцию оценивают по четырехбальной системе в крестах
четыре креста (+ + + + ) — гемолиз эритроцитов от 0 до 0%;
три креста (+ + + ) —гемолиз эритроцитов св. 10 до 40%
два креста ( + + ) — гемолиз эритроцитов св. 40 до 70%;
один крест (+ ) — гемолиз эритроцитов св. 70 до 90%;
отрицательная реакция (—) — гемолиз эритроцитов св. J до
100
% .
Титром антигена считают наибольшее его разведение, ьзы-
вающее полную задержку гемолиза эритроцитов с полиглоити-
ном или референтной овисной сывороткой в разведении 1:10
3. ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЯ
Для каждой проверенной серин антигена составляют протол
испытания, который должен содержать следующие данные: