Стр. 2 ГОСТ 26075— >4
2. МЕТОД ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНЦИИ
коп .
еский (ДАФИ).
Сущность метода заключается в соединении меченых антител
со специфическим антигеном и наблюдении светящихся комплек
сов
а
«антитело-антиген» в полях зрения люминесцентного микрос
2.1. Аппаратура, материалы, реактивы и растворы
Микроскоп люминесцентный.
Термостат с температурой нагрева 37°С.
Холодильник.
Стекла предметные по ГОСТ 9234—75.
Пробирки бактериологические по ГОСТ 25336—82.
Чашки Петри по ГОСТ 25336—82.
Пипетки мерные по ГОСТ 20292—74.
Набор инструментов для вскрытия черепной полости и извле
чения головного мозга животных.
Пинцеты по ГОСТ 21241—77.
Горелка газовая или спиртовая.
Ацетон но ГОСТ 2603—79.
бич
Диагностический иммуноглобулин флуоресцирующий антира
Масло нефлуоресцирующее иммерсионное по ГОСТ 13739—78.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.
Раствор фосфатный буферный, pH 7,4.
2.2. Подготовка к исследованию
2.2.1. Из каждого отдела головного мозга (аммонова рога, моз
жечка. коры больших полушарий и продолговатого мозга) готовят
по два препарата — мазка-отпечатка.
Не допускаются для исследования пробы.консервированные
глицерином, фиксированные этиловым спиртом, формалином и дру
гими средствами, вызывающими денатурацию и разрушение анти
генов или создающими дополнительный («свой») фон свечения.
2.2.2. Препараты высушивают на воздухе и фиксируют в ох
лажденном ацетоне при плюс 4 или минус 12°С в течение 4—12 ч.
Затем препараты извлекают из ацетона, высушивают на воздухе
10 15 мин и помещают их во влажную камеру (чашки Петри с
увлажненным дном).
2.2.3. Диагностический антирабический флуоресцирующий им
муноглобулин (ДАФИ) в рабочем разведении наносят равномерно
иа всю поверхность препарата при помощи пипетки (примерно
0,1 см3 на один препарат), закрывают камеру с препаратами, по
мешают в термостат и выдерживают 30 мин при 3Т°С. Затем пред
метные стекла с препаратом троекратно промывают, погружая
их каждый раз на 10 мин в сосуд, наполненный фосфатным