ГОСТ Р 54001—2010
9
8.3 Метод окрашивания
Применяют краситель — метиленовый синий (метиленового синего 0,05 г, нитрата натрия 0,5 г по
ГОСТ 4168, молочной кислоты 15 см
3
). Зародыши погибших яиц аскарид окрашиваются в синий цвет, а
жизнеспособные не окрашиваются.
8.4 Культивирование яиц гельминтов в оптимальных условиях
Создают условия для развития зародышей у жизнеспособных яиц гельминтов (аскарид, трихоце-
фалов, стронгилят, фасциол) и формирования в них личинок. Культивируют их в термостате при темпе-
ратуре 26 °С—28 °С во влажной камере (в чашках Петри по ГОСТ 25336).
Собранные на предметные по ГОСТ 9284 и часовые стекла по ГОСТ 23932 или фильтры по
ГОСТ 12026 яйца аскарид, фасциол, трихоцефалов, стронгилят помещают в чашки Петри. На дно чаш-
ки для создания влажности кладут вату по ГОСТ 5556, смоченную в воде или 1 %-ном растворе соляной
кислоты по ГОСТ 3118. Чашку закрывают крышкой и помещают в термостат. Чтобы сократить время
на сбор яиц гельминтов для культивирования, пленку с предметных стекол, снятых с центрифужных
пробирок, содержащих яйца гельминтов, смывают струей воды из пипетки в стаканы и добавляют в
них чистую воду. Отстоявшийся осадок с яйцами гельминтов, отмытый от соли, переносят в чашки
Петри, наливают до половины ее объема дехлорированную воду или 0,1 %-ный раствор соляной кис-
лоты и ставят в термостат. Чашки аэрируют один раз в два-три дня. Для этого открывают их крышки и
встряхивают жидкость или подают в них воздух с помощью резиновой груши. Не допускают высыхания
жидкости в чашках, при необходимости добавляют свежую дехлорированную воду. В процессе куль-
тивирования яйца гельминтов периодически просматривают под микроскопом на предметных стеклах
или непосредственно в чашке Петри. Развившиеся жизнеспособные личинки гельминтов имеют мелкую
зернистую структуру. Слабый подогрев препарата или надавливание препаровальной иглой через по-
кровное стекло вызывает их подвижность.
8.5 Инвазионность яиц и личинок аскарид определяют по наличию чехлика (оболочка после линь-
ки) на головном и хвостовом конце, личинок трихоцефалов — по стилету на головном конце. Для под-
тверждения инвазионных свойств личинок аскарид применяют метод биопробы на белых мышах.
8.6 Для оценки жизнеспособности яиц аскарид и трихоцефалов достаточно двух недель. За этот
период основная часть яиц аскарид, фасциол, стронгилят, власоглавов достигает стадии личинок. Для
установленияинвазионныхсвойствяицаскаридихкультивируютвтермостатепритемпературе27°С—
28 °С в течение 30 сут.