ГОСТ Р 54001—2010
8
скопом. Можно пользоваться и большими предметными обезжиренными стеклами, накрывая их поверх
мениска флотационного раствора.
Метод менее точен, чем центрифужный, однако более прост по выполнению, не требует сложного
оборудования и может быть применим для экспресс-диагностики загрязнения бесподстилочного навоза
(помета) яйцами и личинками гельминтов.
Для выполнения указанного метода применяют стаканы для фильтрата по ГОСТ 25336, насы-
щенный раствор соли, предметные стекла по ГОСТ 9284, марлю по ГОСТ 9412 или капроновую ткань с
ячейками 0,1 мм и микроскоп.
7.3 Гельминтологический анализ навоза крупного рогатого скота методом
последовательного промывания
В навозе крупного рогатого скота, помимо яиц стронгилят, трихоцефалов, мониезей, могут содер-
жатся яйца фасциол и дикроцелиев. Для их выделения из проб применяют метод последовательного
промывания. Крупные частицы удаляют из пробы путем промывания осадка через фильтр. Фильтрат
отстаивают, надосадочный слой жидкости сливают, а осадок смешивают с чистой водой и вновь от-
стаивают. Так повторяют до получения просветленного осадка. Для ускорения промывки осадка при-
меняют центрифугирование. Просветленный осадок по частям переносят на предметные стекла или в
чашки Петри и просматривают под микроскопом. Яйца фасциол, имеющие сравнительно большие
размеры (0,13 × 0,7 мм), просматривают с помощью микроскопа МБС-1. Яйца дикроцелиев мельче
(0,03 × 0,02 мм), поэтому необходимо тщательно просматривать препараты под большим увеличением
микроскопа.
7.4 Метод анализа органических удобрений на наличие личинок гельминтов по Берману
Из лабораторной пробы отбирают 50 г анализируемой пробы, переносят ее на слой марли и поме-
щают на металлическую сетку. Затем пробу помещают в аппарат Бермана, который представляет собой
стеклянную воронку по ГОСТ 25336 с размерами диаметра 10—15 см, соединенную резиновой трубкой с
узкой пробиркой по ГОСТ 1770. Аппарат Бермана устанавливают в штатив, наполняют воронку водой при
температуре 37 °С—40 °С, а затем металлическую сетку с пробой помещают в воронку так, чтобы
нижняя часть пробы соприкасалась с водой.
Личинки гельминтов, обладая термотропностью, перемещаются из пробы в теплую воду и оседа-
ют на дно пробирки. Через три-четыре часа пробирку от воронки отсоединяют, сливают надосадочный
слой жидкости, а осадок анализируют на наличие личинок на предметном стекле или в чашке Петри
под микроскопом. При необходимости, для большей концентрации личинок, содержимое осадка цен-
трифугируют.
8 Определение жизнеспособности яиц и личинок гельминтов
8.1 Метод световой микроскопии
Под большим увеличением микроскопа выявляют резко выраженные признаки гибели яиц:
- деформацию оболочек;
- вакуолизацию плазмы зародыша;
- прогибание оболочек внутрь, разрушение оболочек и зародыша;
- смещение плазмы зародыша к боковой части внутри оболочек яйца или к его полюсу.
Признаками гибели яиц гельминтов, находящихся на стадии дробления бластомеров, являются:
- образование вакуолей в виде мелких и крупных пузырьков воздуха;
- неравномерность шаров дробления;
- рыхлая, комковатая зернистость плазмы.
8.2 Подвижность личинок устанавливают легким надавливанием на препарат через покровное
стекло по ГОСТ 6672 препаровальной иглой, резким изменением освещения или слабым подогревом
препарата. Погибшими считают личинки ( в том числе вышедшие из яиц), если они выпрямлены, не-
подвижны, имеют разрушенные структуры, вакуоли, деформированные оболочки. Для определения их
подвижности применяют метод слабого подогревания препарата или помещают в теплый раствор жел-
чи крупного рогатого скота и разбавленной дистиллированной воды в соотношении 1:20.