ГОСТ 7702.2.6-93
окрашивание для выявления спор по ГОСТ 30425. определение каталазной активности. При этом
культуру для мазков и исследований отбирают со дна пробирки.
2.1.3 Сульфитредуцирующие клостридии представляют собой грамположительные палочки,
располагаюшиеся в одиночку, попарно, в виде цепочек или скопления параллельных клеток. При
спорообразовании споры сульфитредуцирующих клосгридий овальные или сферические, централь
ные. субтерминальные или терминальные.
2.1.4 Ятя определения каталазной активности на предметном стекле в каплю культуральной
жидкости добавляют каплю перекиси водорода массовой концентрации 30 г/дм3. Выделение пу
зырьков газа свидетельствует о каталазной активности.
Сульфитредуцирующие клостридии каталазы не образуют.
2.1.5 Ятя подтверждения анаэробного роста культуру из среды Кнтт-’Гароцци пересевают в
стерильные чашки Петри глубинным способом по ГОСТ 26670 с заливкой одной из агаризованных
сред, приготовленных по ГОСТ 7702.2.0/ ГОСТ Р 50396.0, 2.4.1—2.4.5. Затвердевшую среду накры
вают стерильным предметным стеклом, чашки переворачивают, посевы инкубируют при температу ре
(37 i I) "С в течение 24—48 ч. Появление колоний в глубине агара на 2—3 мм от края стекла
свидетельствует о принадлежности микроорганизмов к клостридням.
2.1.6 При втором методе исследования сначала исследуемый материал высевают в среду
Китт-Тароцци, инкубируют, проводят микроскопированне, определение каталазы, пересев под
стекло, как указано в 2.1.2—2.1.5. Установив принадлежность микроорганизмов к клостридням,
проводят пересев на железосульфитсодержащие среды. Определяют сульфитредуцирующую
способность выделенных клосгридий по 2.1.1.
2.1.7 Выделение спор сульфитредуцирующих клосгридий проводят после прогревания иссле
дуемого материала. Пробирки с исследуемой навеской продукта или смывов и (или) их разведений
помещают в водяную баню температурой (50 £ 1) *С. Воду в бане греют до достижения внутри про дукта
или смыва температуры (80 i 1) *С, которую определяют в контрольной параллельной про бирке со
средой без посева. Прогрев проводят (20 i 1) мин. Затем пробирки с исследуемым материалом
охлаждают водопроводной водой. Далее исследование проводят по 2.1.1—2.1.6.
2.2При определении количества сульфитредуцирующих клосгридий используют метод посе
ва в железосульфитсодержащие агаризованные среды или в жидкие среды по методу НВЧ.
2.2.1 При определении количества сульфитредуцирующих клосгридий методом посева в ага
ризованные среды по 1 см3 разведений продукта или смыва вносят в две чашки Петри. Посевы за
ливают одной из железосульфитсодержаших агаризованных сред. Проводят инкубирование в
анаэробных условиях по 2.1.1 с последующим подсчетом и подтверждением принадлежности вы
росших колоний к сульфитредупирующим клостридням по 2.1.2—2.1.5.
2.2.2 При определении количества сульфитредуцирующих клосгридий по методу НВЧ высе
вают три последовательных 10-кратных разведения в регенерированную среду Кит-Тароцци. Каж
дое разведение в трехкратной повторности, соотношение высеваемого материала к питательной
среде 1:9. Инкубирование посевов и подтверждение принадлежности выделенной культуры к суль-
фитредуцирующим клостридням проводят по 2.1.6.
3 Обработка результатов
3.1 Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
3.2 При подтверждении принадлежности выделенных микроорганизмов к клостирндиям с
сульфитредупирующими свойствами дают заключение.
3.3 Результаты выявления сульфитредуцирующих клостирндий в исследуемой пробе записы
вают: сульфитредуцирующие клостридии обнаружены или не обнаружены, при этом указывается
масса продукта в граммах или объем смывной жидкости в кубических сантиметрах, или поверхность в
квадратных сантиметрах.
3.4 При определении количества сульфитредуцирующих клостридий при посеве на а в и зо
ванные среды проводят подсчет по ГОСТ 7702.2.1 / ГОСТ Р 50396.0. 3.2.2, при определении коли
чества по методу НВЧ подсчет проводят по ГОСТ 30425.
Результаты количественного определения сульфитредуцирующих клостридий записывают по
ГОСТ 7702.2.1 / ГОСТ Р 50396.0, 3.3.
2