ГОСТ 28087-89 С. 3
2.6. Определение безвредности
Сущность метода заключается в определении реакции у лабораторных животных на введение
вакцины в тест-дозе.
2.6.1. Аппаратура и материалы
Шприцы вместимостью 2 и 5 см3 по ГОСТ 22967.
Иглы инъекционные по ГОСТ 25377*.
Флаконы стеклянные вместимостью 200 см3.
Пипетки стеклянные мерные вместимостью I, 5 и 10 см3.
2.6.2. Подготовка к испытанию
Для проведения испытания используют 10 флаконов с вакциной. Из каждого флакона после
тщательного встряхивания отбирают по 5—10 см3 вакцины в стерильной флакон, объединяя
пробы.
2.6.3. Проведение испытания
Для определения безвредности вакцины используют белых мышей живой массой 18—20 г и
морских свинок живой массой 350—400 г. Десяти белым мышам вакцину вводят подкожно в облас ти
спины по 1см3 и пяти морским свинкам подкожно в области живота по 2 см3.
2.6.4. Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если в течение 10 сут после ее введения не наступает гибель или
заболевание животных. Допускается на месте введения вакцины образование припухлости.
2.7. Определение иммуногенной активности
Сущность метода заключается в определении специфической активности вакцины в сравне
нии с референс-препаратом.
2.7.1. Аппаратура и реактивы
Шприцы вместимостью I см3 по ГОСТ 22967.
Иглы инъекционные по ГОСТ 25377.
Флаконы стеклянные вместимостью 100 см3.
Пипетки стеклянные мерные вместимостью 5 и 10 см3.
Референс-препарат сухой.
Токсин ботулический типа С.
2.7.2. Подготовка к испытанию
Для определения иммуногенной активности вакцины используют 10 флаконов с вакциной.
Объединенную пробу вакцины для испытания готовят по п. 2.6.2.
2.7.3. Проведение испытания
Иммуногенную активность вакцины определяют на белых мышах живой массой 18—20 г в па
раллельном опыте в сравнении с референс-препаратом.
Референс-препарат представляет собой сухую вакцину против ботулизма норок, фасованную в
ампулы по 2 см3, с определенной иммуногенноегью.
Вакцину и референс-препарат вводят однократно подкожно двум группам белых мышей по
40 голов в каждой группе. Одну группу белых мышей вакцинируют испытуемой вакциной, а вторую
группу референс-препаратом. Мышей обеих групп иммунизируют дозами 0.05; 0,1; 0,2 и 0,4 см3, ис
пользуя по 10 белых мышей на каждую дозу испытуемой вакцины и референс-препарата.
Через 21 сут после вакцинации животным обеих групп вводят подкожно ботулический токсин
типа С вдозе 10ДЛМ. Одновременно токсин вводят 5 контрольным белым мышам такой же живой
массой вдозе по 1ДЛМ. которым не вводилась испытуемая вакцина и референс-препарат. Резуль
таты учитывают в течение 120 ч с момента введения токсина.
2.7.4. Обработка результатов
Подсчитывают по каждой дозе в группе животных, вакцинируемых испытуемой серией вакци
ны. и группе животных, привитых референс-препаратом. отношение количества выживших живот
ных к их числу, взятому для опыта.
Значения отношений суммируют по каждой группе отдельно.
По сумме отношений по табл. 2 находят дозу испытуемой серии вакцины и дозу референс-пре
парата, предохраняющих от гибели 50
%
вакционированных белых мышей, а также прививочную
дозу для норок.
♦ ГОСТ 25377—82 действует только на территории Российской Федерации (здесь и далее).