Стр. 2 ГОСТ 2SM0— 83
2.
серо
логический МЕТОД
Сущность метода заключается в выявлении способностей сы
вороток нейтрализовать цнтопатнчсскос действие (ЦПД) вируса
трансмиссивного гастроэнтерита в культуре клеток.
2.1. Апп арат ура н м а т е р и а л ы
Дли проведения исследования применяют:
мккротнтратор;
пластины пластмассовые с 96 лунками;
термостат для культивировании клеточных культур в атмосфе
ре, содержащей 5% углекислого газа;
термостат;
микроскоп;
горелку газовую;
баню водяную;
штативы для пробирок;
стерилизатор;
холодильник;
пипетки по ГОСТ 20292—74;
пробирки по ГОСТ 25336—82;
пробки резиновые;
культуры клеточные почек или щитовидных желез свиней;
ми
среду поддерживающую с антибиотиком (пенициллин, стрепто
цин или др.);
референтные штаммы вируса с известным титром;
сыворотки крови свиней отрицательную и положительную;
сыворотку крови телят для культивирования культур тканей;
трипсин, 0,2%-ный раствор для подготовки клеточных суспен
зий.
2.2. Проведениеи с с л е д о в а н и я
Исследования проводят макро- и микроыетодами.
Макрометол применяют для оценки благополучия хозяйства на
трансмиссивный гастроэнтерит,мнкрометод — для определения
стадии развития инфекционного процесса.
При постановке реакции централизации вирусов указанными
методами проводят контрольное титрование разведенного вируса
и известной положительной и отрицательной сывороток.
2.2.1. Макрометод
Сыворотки крови в разбавлении 1:2 или 1:4 инактивируют
в термостате при 56СС в течение 30 мин.
Б пробирки вносят по 0.4 см3 поддерживающей среды и готовят
двукратные разбавления сывороток крови в соотношении от 1:4 до
1:236.
Вирус с известным титром предварительно разбавляют в поддер
живающей среде так, чтобы 1 см3 содержал 100 ТЦДзо- Затем в