ГОСТ Р 52391—2005
7.2 Измерение оптической плотности
В кюветы с помощью пипетки и микропипетки дозируют растворы реактивов и пробу в количествах
и в порядке, указанном в таблице 2.
Т а б л и ц а 2
Наименование растворов
Объем.см’
Контрольный раствор (Ии.)
Испытуемый раствор (И,пг)
Буферный раствор по 6.3.4
1.00
1.00
Раствор NADH по 6.3.5
0,10
Проба
0.10
_
0,20
Бидистиллированная вода
2.00
1.80
Раствор МДГГ/ЛДГГ по 6.3.6
0.02
0.02
Растворы в кювете осторожно перемешивают стеклянной или пластмассовой палочкой и выдер
живают в течение (5,01 0.5) мин.
Проводят измерениеоптической плотности относительно воздуха контрольного(Л|К)и испытуемо
го (ЛП1|1) растворов с записью результата измерения до третьего знака после запятой.
Затем в растворы добавляют по 0.02 см3раствора цитрат-лиазы. приготовленного по 6.3.7. пере
мешивают и выдерживают в течение (5.0± 0.5) мин. Повторно проводят измерение оптической плотнос ти
относительно воздуха контрольного (Л,к) и испытуемого (Л211Р) растворов с записью результата
измерения до третьего десятичного знака.
8 Обработка результатов измерений
8.1 Массовую концентрацию лимонной кислоты
С,
мг/дм3, вычисляют по формуле
С ж а АА К.
(1)
где
а
= 488 мг/дм3для измерений при X= 334 нм;
а
= 479 мг/дм3для измерений приХ= 340 нм; а
= 887 мг/дм3для измерений при Х= 365 нм;
&А
— разность оптических плотностей, вычисленная по формуле (2);
К
— коэффициент разбавления по 7.1.3.
8.2 Разность значений оптических плотностей вычисляют по формуле
\А
= (Л,
п
р
— ’Ьпр) “ (Л к “ Л2К),(2)
гдеЛ1При
А
ю р— значения оптической плотности испытуемого раствора до и после реакции с цит-
рат-лиазой ло 7.2;
А
,к и
А,к
— значения оптической плотности контрольного раствора до и после реакции с цит-
рат-лиаэой ло 7.2.
П р и м е ч а н и е — Если (Ищ—И;*) имеет отрицательное значение, то его суммируют с
(Атр—Атг)-
Опре
деленная по формуле (2) разность значений оптических плотностей АЛ. как правило, составляет не менее 0,100 и
не более 0,800. В противном случае изменяют коэффициент разбавления по 7.1.3.
Вычисления проводят до первого десятичного знака.
За результат анализа принимают среднеарифметическое значение двух результатов параллель
ныхопределений, округленноедо целого числа, абсолютное расхождение между которыми не превыша
ет предела повторяемости (сходимости)
г.
Значения предела повторяемости (сходимости) г приведены в таблице 4. Результаты измерений
считают приемлемыми при условии
\Хх-Х2\йг,
(3)
где Л’,. Л’,— массовая концентрация лимонной кислоты в двух параллельных определениях.
5