ГОСТ 29267-91 С. 3
2.3. Метод визуальной оценки
2.3.1. Метод заключается вдиагностике зараженности растений и клубней по признакам, види
мым невооруженным глазом. При тщательном осмотре вываляют патологические отклонения от нормы
по окраске, форме и фактуре листьев, стеблей, общему развитию куста, пробирочного растения,
форме и окраске клубней.
2.3.2. Визуальную оценку оздоровленного исходного материала проводят.
непосредственно перед реализацией в соответствии с требованиями п. 1.3.1 - для растений
in vitro:
во время приемки в установленном порядке —для посадок в поле:
сплошным осмотром растений —в теплине;
при клубнепом анализе —для клубней.
Результаты оценки в поле, теплице оформляют актом приемки исходного оздоровленного мате
риала (см. приложение 3).
2.3.3. Описания основных внешних признаков грибных, бактериальных и функциональных (не
паразитарных) болезней клубней картофеля приведены в ГОСТ 11856. вирусных болезней растений и
клубней - в приложениях 4, 5.
2.4. Метод клубневого анализа
2.4.1. Клубневой анализ проводят по ГОСТ 11856. определяя показатели качества в соответствии
с требованиями ГОСТ 29268*.
2.4.2. Тепличные клубни разрезают только псомнительных случаях.
2.5. Метод иммуноферментного анализа
2.5.1. Подготовка к анализу
2.5.1.1. Для проведения ИФЛ отбирают пробы:
на вирусы —листовой материал (проба листьев с верхнего, среднего и нижнего ярусов расте
ний) или ростки клубней длиной 1—2 см;
на бактерии —стебли длиной 5 - 10см. срезанные во время уборки на уровне корневой шейки,
или кусочки ткани размером I-2 см, вырезанные в столонной части клубия.
Пробирочные растения диагностируют только на вирусы.
2.5.1.2. Клубни проращивают при температуре 18—20 *Сдо появления ростка длиной 1—2 см. Если
клубни находятся в состоянии глубокого покоя, то его прерывают обработкой в парах риндита (1 см1
на I кг клубней) в течение 48 ч при температуре 25 *С в герметической камере или обработкой
раствором с ростовыми веществами — (10 г тиомочевины и 5 мг гиббереллина на 1 дм’ поды) в
течение 20—30 мин.
2.5.1.3. Отобранные пробы (листья, кусочки стеблей или клубней) измельчают до кашицеобраз
ного состояния в ступке или отжимают сок прессом.
2.5.1.4. Приготовление рабочих растворов из набора реактивов для ИФЛ
2.5.1.4.1. Приготоаление покровного буфера. Содержимое флакона «покровный буфер* растворя
ют в 100см’ дистиллированной воды.
2.5.1.4.2. Приготовление антител. 0,1 см* концентрированного раствора антител разводят в 10см3
покровного буфера. Для приготовления концентрированного расгвора антител сухое содержимое фла
кона с этикеткой «антитела» растворяют в I см3покровного буфера.
2.5.1.4.3. Приготоаление промывочного буфера. Содержимое флакона с этикеткой «промывоч -
ный буфер» растворяют в 2 дм3 дистиллированной воды, добааляют 0,5 см3 детергента на 1 дм3
буферного раствора.
2.5.1.4.4. Приготовление буфера для проб и разведения конъюгата. К 250 см’ промывочного буфе
ра добавляют 1,0 г бычьего сывороточного альбумина (содержимое флакона).
2.5.1.4.5. Приготоаление конъюгата. 0,02 см1концентрированного раствора из флакона «конь-
югат» смешивают с 10см3пробно-конъюгатного буфера.
2.5.1.4.6. Приготоаление положительного контроля. Содержимое флакона «положительный конт
роль* растворяют в 1см3пробно-конъюгатного буфера.
2.5.1.4.7. Приготовление субстрата. I объем буферного концентрата из флакона «субстратный бу
фер* разбавляют 4 объемами дистиллированной воды. В 10 см3буферного раствора растворяют 4 мг
содержимого флакона «субстрат*.
* На территории Российской Федерации рекомендуется использовать ГОСТ Р 53136—2008.
81