ГОСТ Р ИСО 22612—2022
6.3.2Выполнение заражения
6.3.2.1 Готовят 50 г стерильного талька в подходящем контейнере и стерилизуют при температу
ре 160 °С сухим нагревом в течение 2—3 ч.
Вскрывают ампулу, в которой содержится 5 мл суспензии спор в растворе этанола.
Наносят суспензию спор в 50 приемов (50 * 0,1 мл) на тальк.
После каждого приема нанесения спор встряхивают закрытый сосуд на вихревом вибра
6.3.2.2
6.3.2.3
6.3.2.4
торе.
6.3.2.5
Помещают открытый сосуд в эксикатор с силикагелем и сушат при комнатной температуре
в течение двух-трех дней.
6.3.2.6
6.3.2.7
Взвешивают сосуд до и после просушивания, чтобы обеспечить полное высушивание.
Оценивают бионагрузку, выраженную в КОЕ/г (путем высева на три чашки в двух повтор
ностях), смеси талька со спорами на среду TGEA или аналогичную среду после инкубации в течение
12— 18 ч при температуре 35 °С.
6.3.2.8 Выбирают рабочую концентрацию спор 104 или 108 КОЕ/г талька. Следят за тем, чтобы
споры были равномерно распределены в тальке.
7 Проведение испытания
7.1 Вырезают 12 образцов материала для испытания размером 200 мм * 200 мм.
7.2 Испытуемые образцы помещают в пакеты для стерилизации и стерилизуют методом, пред
ложенным изготовителем.
7.3 Помещают контейнеры в пакеты для стерилизации и стерилизуют.
7.4 Закрепляют основания контейнеров на плитке из камня с помощью фиксирующей пластины
и зажимов.
7.5 В асептических условиях извлекают образцы из пакетов и помещают в горловины испытатель
ных контейнеров.
7.6 Крышками с поршнями закрывают контейнеры, фиксируя, таким образом, испытуемые образ
цы с контролируемым провисанием.
7.7 Извлекают поршни.
7.8 Насыпают порцию зараженного талька массой (0,5 ± 0,1) г через каждое отверстие для порш
ня на пять из шести испытуемых образцов, оставляя шестой в качестве контрольного.
7.9 Герметизируют отверстия изолирующей пленкой.
7.10 Надевают небольшие пластиковые пакеты на каждый контейнер.
7.11 Через прорезь у основания контейнера вставляют открытую чашку Петри.
7.12 Прорези закрывают изолирующей пленкой.
7.13 Включают вибратор при таком потоке воздуха, чтобы достичь частоты вибрации 20 800 ви
браций в минуту.
7.14 Снимают пластиковые пакеты и изолирующую пленку.
7.15 Через прорези вставляют крышки для чашек Петри.
7.16 Извлекают чашки Петри и инкубируют их при температуре 35 °С в течение 24 ч.
7.17 Подсчитывают число образовавшихся колоний. На 6-ой (контрольной) чашке Петри не долж
но быть роста колоний
Bacillus subtilis.
В противном случае результаты испытаний не засчитывают, так
как произошла контаминация.
7.18 Для каждого материала повторяют шаги 7.1—7.17.
7.19 Вычисляют среднее арифметическое значение из 10-ти полученных достоверных резуль
татов.
8 Протокол испытания
Протокол испытания должен включать следующую информацию:
a) идентификацию испытуемого материала;
b
) условия испытания, особенно выбранную частоту вибраций в 6.3.2.8 и 7.13.
c) число испытанных образцов;
d) любые отклонения от настоящего метода;
e) подробное описание процедуры заражения;
f) методику подсчета бактерий (см. 7.19).
3