ГОСТ Р 57245—2016
- палочка стеклянная;
- желчь медицинская по [7] (далее — желчь);
- агар сухой питательный (СПА) или агар мясопептонный:
- вода питьевая по ГОСТ Р 51232 (далее — вода).
5.6.2 Проведение испытаний
1г гомелина помещают в колбу размельчителя тканей РТ-2, наливают 50 см 30.5 %-ного стериль
ного водного раствора желчи и перемешивают в течение 2 мин со скоростью 3000 об/мин. Затем объем
содержимого колбы доводят до 100 см3водным раствором желчи, осторожно перемешивают стеклян
ной палочкой.
Концентрация гомелина в приготовленной суспензии составляет 0.01 г/см3.Из нее путем последо
вательных разведений (10‘4,10в,10’в,10 9) приготавливают суспензию таким образом, чтобы на чашке
Петри выросло 50—200 колоний.
Полученную суспензию засевают по 1 см3 в трех чашках Петри. Суспензию берут стерильной
пипеткой, помещают в центр каждой чашки Петри, заливают стерильной расплавленной и охлажден
ной до 50 °С — 60 ’С агаризованной питательной средой и тщательно перемешивают, делая чашками
Петри круговые движения по гладкой поверхности стола.
После застывания агаризованной питательной среды чашки Петри помещают в термостат и вы
держивают в течение (24 ±0.5) ч при температуре (29 ± 1) °С. Затем производят подсчет взрослых
колоний, применяя прибор для подсчета колоний.
Испытания проводят в двух параллельных определениях.
5.6.3 Обработка результатов
Число жизнеспособных спор в 1 г гомелина (Х2). измеряемое в миллиардах спор на грамм вы
числяют по формуле
хг*~р~у"(2)
где П — среднее арифметическое число подсчета колоний на трех чашках Петри;
Р — концентрация суспензии, г/см3;
V — объем суспензии, взятой для высева, см3.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух
параллельных определений.
Допускаемое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно пре
вышать 30 % по отношению кбольшему числу.
5.7 Определение биологической активности
Метод основан на определении концентрации гомелина. вызывающий 50%-ную гибель тест-
объекта при свободном поглощении зараженного корма и вычислении биологической активности от
носительно контрольного образца.
5.7.1 Аппаратура, материалы, реактивы
- размельчитель тканей РТ-1 и РТ-2 по [4] или гомогенизатор другой аналогичной марки;
- электрокофемолка по ГОСТ 19423;
- весы лабораторные общего назначения 3-го класса точности с наибольшим пределом взвеши
вания 20 г по ГОСТ 24104 или других аналогичных марок;
- весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвеши
вания 200 г по ГОСТ 24104 или других аналогичных марок;
- термостат или бокс термостатированный, поддерживающий температуру (21 ± 1) вС, с устрой
ством автоматического равномерного освещения каморы лампами дневногосвета в течение 18ч в
сутки;
- баня водяная с пределом терморегуляции от 20 до 100 X и точностью терморегуляции ±3 °С.
- холодильник бытовой по ГОСТ 16317;
- термометр П5 по ГОСТ 28498;
- камера климатическая или бокс термостатированный, поддерживающийтемпературу (21 ±1)°С;
- штатив металлический;
- пипетка вместимостью 1,5, 10 см3по ГОСТ 29227-91;
- цилиндры вместимостью 50. 100. 500 см3по ГОСТ 1770;
6