ГОСТ Р 57245—2016
Для использования яйцеклеток в более поздние сроки их помещают в холодильник и постоянно
хранят при температуре 0 X — 5 X .
5.7.2.6Для опыта навеска яиц массой 5— 7госвобождают от пушка путем легкого трения в капро
новом мешочке под струей воды при температуре 20 вС — 30 X .
5.7.27 Очищенные яйца обеззараживают в течение 15 мин в растворе 1:1 40 %-ного водного
раствора формалина и 95 %-ного этилового спирта с последующей промывкой в проточной воде при
температуре 20 °С — 30 °С в течение 15—20 мин.
Затем яйца высыпают на фильтровальную бумагу, просушивают в чистом помещении 30 мин и
помещают в чашку Петри на фильтровальную бумагу с вырезанным сектором, в который вкладывают
ватный тампон, смоченный 0,1 %-ным раствором марганцовокислого калия. Тампон недолжен касаться
бумаги.
57.2.8 Чашку Петри помещают в климатическую камеру при температуре (21 ± 1) X . относи
тельной влажности воздуха 70—90 % в равномерном освещении камеры лампами дневного света
освещенностью не менее 100 лк в течение 18 ч в сутки и выдерживают от начала до рождения
гусениц.
57.2.9 В период массового рождения гусениц их рассаживают в чашки Петри по 150—
200 штук, в которые предварительно наносят питательную среду толщиной 3—5 мм кольцом от
1/3до 2/3 диаметра чашки Петри. Гусениц содержат в климатический камере, при режимах по 57.2.8
без смены корма.
Питательную среду готовят следующим образом:
200 г сухих семян фасоли замачивают 300 см3воды в течение суток, затем в размельчителе тка
ней РТ-1 размельчают до образования однородной кашицы. Постоянно помешивая, добавляют после
довательно следующие компоненты:
- 15 гдрожжей.
• 12 г сахарозы.
- 3 г метабена. растворенных в 10 см3этилового спирта,
- 4 г калия фосфорнокислого двузамещенного,
- 5 см340 %-ного раствора формалина.
- 9 г стерильной, измельченной в электрокофемолке фильтровальной бумаги, на которую вылива ют
расплавленный, охлажденный до температуры 70 X агар (15 г микробиологического агара,
расплавленного в 350 см3воды).
Смесь охлаждают до температуры 40 X , вносят 4 гаскорбиновой кислоты и перемешивают.
Питательную среду разливают в стерильные банки, закрывают стерильной бумагой и хранят при
температуре 5 X не более 14 дней.
5.7.2.10 Первых перелинявших на 2-й возраст гусениц, количество которых не более 5 % от от
родившихся, выбраковывают. Массовый выбор тест-обьекта проводят на 2—3-й день после начала
линьки вручную.
57.3 Проведение испытания
Готовят параллельные водные суспензии контрольного образца в гомелине из расчета 1 г препа
рата и 99 г воды в пяти концентрациях: 0,25: 0,06: 0,016; 0,004: 0,001 %. обеспечивающих гибель тест-
объекта от (15 ±56) до (85 ±5) %.
Исходную 0.25 %-ную суспензию готовят с помощью размельчителя тканей РТ-2 при скорости
3000 об/мин в течение 2 мин. а суспензию других концентраций — путем последовательных четырех
кратных разведений.
Каждую концентрацию гомелина испытывают в трех параллельных определениях.
3см3суспензии каждой концентрации тщательно перемешивают с 15 гпитательной среды в ступ
ке до получения однородной массы.
Полученную массу раскладывают на внутреннюю поверхность крышки чашки Петри по (5 ±1) г в
каждую. Туда же помещают по 15 гусениц второго возраста. Одновременно ставят контрольный опыт в
трех параллельных определениях:
- 15 г питательной среды перемешивают с 3 см3 воды и полученную массу распределяют в
3 чашки Петри, в каждую из которых помещают по 15 гусениц. Чашки Петри с гусеницами по
мещают в термостат и выдерживают при температуре (21 ±1) X . Количество погибших гусениц
подсчитывают на 6 сутки.
8