ГОСТ Р 57025—2016
8.2.2.3 Приготовлениебуферного раствора по Макилвейнус pH (2.6 ± 0.1)
В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 89.1 см3 раствора лимонной кислоты (см. 8.2.2.1) и
10.9 см3раствора гидрофосфата натрия (см. 8.2.2.2), контролируя значение pH с помощью рН-метра,
перемешивают.
Срок хранения раствора при температуре от 2 °С до 8 °С — не более одной недели.
8.2.2.4 Приготовление рабочего буферного раствора
В мерную колбувместимостью 10см3вносят9см3реакционного буферного раствора №5 (см. при
ложение Б), добавляют 1см3метанола, перемешивают изакрывают притертой пробкой.
Используют свежеприготовленный раствор.
8.2.2.5 Приготовление раствораДДБ с молярной концентрацией 0.01 моль/дм3
В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 113.7 мг ДДБ. растворяют в небольшом количестве
ацетонитрила, затемдоводят раствордо метки этим же растворителем.
Используют свежеприготовленный раствор.
8.2.2.6 Приготовление вспомогательного раствора 1(ВР1)
В мерную колбу вместимостью 100 см3вносят 50 см3буферного раствора (см. 8.2.2.3) идоводят
раствордо метки ацетонитрилом.
Используют свежеприготовленный раствор.
8.2.2.7 Приготовлениевспомогательного раствора 2 (ВР2)
В мернуюколбувместимостью100 см3вносят 5 см3аммиака идоводятраствор дометки метанолом.
Используют свежеприготовленный раствор.
8.2.2.8 Приготовление рабочего раствора буферадля промывки
В колбу вместимостью 100 см3 вносят 95 см3деионизованной воды, добавляют 5 см3 раствора
No21>(см. приложение Б), перемешивают на шейкере втечение 2 мин.
Растворхранят при температуреот 2 °Сдо 8 °С. Срокгодности — 1мес.
8.2.2.Э Приготовление рабочего раствора ферментного конъюгата
В пробиркувместимостью 15см3вносят 1.8 см3раствора№ 5 (см. приложениеБ) и0.2 см3раствора
№ 4 (см. приложение Б), аккуратно перемешивают.
Используют свежеприготовленный раствор.
8.2.2.10 Приготовление рабочих градуировочных растворов М3 К0—Кл
а) Приготовление исходного раствора М3 К5
Для приготовления исходного раствора Кьс концентрацией М3 12.8 нг/см3в пробирку, вместимос
тью 15 см3вносят 0.9 см3раствора № 5 и 0,1 см3раствора Ne 3 (см. приложение Б), перемешивают на
шейкере в течение 30с.
б) Приготовление рабочих градуировочных растворов М3 К0—Кл
Рабочиеградуировочные растворыК0—Кл готовятв пробиркахвместимостью 15см3согласно таб
лице 4.
Т а б л и ц а 4 — Приготовление рабочих градуировочных растворов
K0— Kt
Обозначение и массовая концентрация
приготовляемого раствора М3
Вносимый объем, см5
рабочего бу
ферного рас
твора (8.2 2.4)
исходного
раствора Х3
рабочего
раствора
КА
рабочего
раствора
К3
рабочего
раствора
Kt
Кл
(3.2 нг/см3)
0.75
0.25
—
—
—
К3
(1.6 нг/см3)
0.5
—
0.5
—
—
К2
(0.8 нг/см3)
0.5
—
—
0.5
—
К, (0.4 нг/см3)
0.5
—
—
—
0.5
К0
(0 нг/см3)
1.0
—
—
—
—
Пробирки закрывают крышками и перемешивают на шейкере в течение 20 с.
Используют свежеприготовленные растворы.
11При хранении раствора К» 2 могут образовываться кристаллы, поэтому перед отбором аликвоты данного
реактива необходимо слабо подогреть пробирку с ним при температуре 37 °С в водяной бане или е термостате до
полного растворения кристаллов.
6