ГОСТ ISO 7358—2015
4.1 Контрольное вещество: бергаптен. известнойчистоты большей или равной95 %.
4.2 Внутренний стандарт: кумарин, известной чистоты большей или равной 98 %.
4.3 Растворитоли
4.3.1 Хлороформ, ч. д. а., содержащийменее 2%(пообъему) этанола, для использования вподго
товке пробы эфирного масла, содержащего бергаптен. и подготовке как внутреннего стандарта, так и
подвижной фазы.
4.3.2 Гексаи. чистыйдля хроматографии, для использования в подвижной фазе (см. 4.3.4).
4.3.3 Этилацетат. чистый для хроматографии, для использования в подвижной фазе (см. 4.3.4).
4.3.4 Подвижная фаза
Для подвижной фазы используют растворители качества, совместимого с системой обнаружения,
и готовят их в количестве, достаточным для полного анализа. Смешивают, например, одни из следую
щих:
4.3.4.1 Гексан (см. 4.3.2)и этилацетат(см. 4.3.3)в отношении 80:20 пообъему.
4.3.4.2 Гексан (см. 4.3.2) ихлороформ (см. 4.3.1) вотношении85:15 пообъему.
5 Оборудование
5.1 Системадля ВЭЖХ. состоящая изследующего оборудования.
5.1.1 Жидкостный хроматограф.
5.1.2 Колонка, из нержавеющей стали, длиной от 150 до 250 мм, внутренним диаметром от 4 до
5 мм изаполненнаянеподвижнойфазой, состоящейизгранулированногодиоксидакремния, чистогодля
хроматографии, с размером гранул около 5 мкм.
5.1.2* Система подачи растворителя, способная подавать подвижную фазу при постоянной или
программируемой скорости потока.
5.1.3 Системадегазации растворителя (не обязательно).
5.1.4 УФ детектор со спектральнымдиапазономдлин волн от254до 313 нм.
5.1.5 Записывающееустройство и(не обязательно) интегратор, подходящиедляданной системы
ВЭЖХ.
5.2 Мерные колбы, вместимостью от 15до 150 см3, в зависимости от предполагаемого содержа
ния бергаптена в пробе.
6 Подготовка пробыдля испытания
Подготовка пробыдля испытания в соответствиис ISO 356.
При наличии небольшого осадка пробуслегка подогревают.
7 Проведение испытания
7.1 Условия проведения ВЭЖХ
Настраивают скорость потока подвижной фазы (см. 4.3.4) так. чтобы получить хорошее разделе
ние пиков, соответствующих бергаптенуи кумарину, отдругих компонентовэфирного масла, обнаружи
ваемых УФ детектором (см. 5.1.4). Скорость потока обычно составляет от0,5 до 1смэ/мин.
Следуют процедуре, указанной в ISO8432.
7.2 Определение
7.2.1 Метод внутреннего стандартадля эфирных масел с массовой долей бергаптена
от 0,001 %
7.2.1.1 Оптимизация условий проведенияанализа ВЭЖХ
7.2.1.1.1 Разделение
Удостоверяются, что пик бергаптена полностью отделен от пиков других компонентов эфирного
масла на полученных хроматограммах. Кроме того, проверяют, чтобы пиквнутреннего стандарта, кума
рина (см. 4.2), не маскировал и(или)частично не перекрывал пикидругих компонентов эфирногомасла.
Определяютвремя удерживания бергаптена икумарина.
* Так в оригинале ISO 7358:2002.
2