ГОСТ 33775—2016
6.3.2.3Образец стокового раствора хранят в морозильной камере при ,1-10 °С для проведения
аналитического определения концентрации испытуемоговещества.
7 Проведение испытания
7.1 Условия воздействия
7.1.1 Экспериментальным блоком является отдельная ячейка, содержащая личинки. Минимум
двенадцать личинок от каждой из трех семей помещают в один и тот же планшет для каждого уровня
обработки и контроля(ей) и стандартного химического вещества. Для каждого испытания используют
следующие обработки и контроль(и):
- контроль без растворителя (минимум 12 личинок х 3 семьи = 36 личинок минимум);
- контроль с растворителем, при необходимости (минимум 12 личинок хЗ семьи = 36 личинок
минимум);
- пять обработок, то есть пять испытуемых концентраций в возрастающем порядке (каждая из
которыхсодержитминимум 12личинок х 3 семьи = 36личинокминимум наобработку) вгеометрической
прогрессии, различающихся неболее чем втрираза ивключающихзначение LD50;альтернативно, если
проводят определение диапазона предельных концентраций (см. 7.3). то может быть тестирована
разовая доза 100 мкг ДВ (или испытуемого химического веществаУличинку или доза на уровне макси
мально возможной растворимости, в зависимости от того, что ниже;
- стандартное химическое вещество, диметоат 8.8 мкг/личинку (минимум 12 личинок х 3 семьи =
= 36 личинок минимум).
7.1.2 Виспытании используют вобщейсложностисемь-восемь (если используется растворитель)
луночных планшетов. Каждую группу минимум по 12 личинок от каждой из трех семей принимают за
повторностьдля данного уровня обработки иидентифицируют кактаковую на микропланшете.
7.1.3 Во время проведения всего испытания планшеты держат в темноте. Во время испытания
температуру в термостате поддерживают в диапазоне от 34 °Сдо 35 °С. Однако допускаются отклоне
ния. но температура не должна быть ниже 23 °С или выше 40 °С. и такие отклонения не должны иметь
место в течение более 15 мин один раз за 24 ч.
7.2 Испытание для установления предела концентраций
С целью установления подходящего диапазона LD50 рекомендуется провести предварительное
испытание с использованием концентраций испытуемого вещества, различающихся в геометрической
прогрессии от 5 до 10 раз.
7.3 Определение диапазона предельных концентраций
В некоторых случаях (например, когда предполагается, что испытуемое химическое вещество
обладает низкой токсичностью, или когда химическое вещество является трудно растворимым в воде)
определениедиапазона предельныхконцентраций можетбытьпроведеносиспользованием 100 мкг ДВ
(или испытуемогохимическоговеществаУличинку или на уровне максимальновозможнойрастворимос
ти для слабо растворимых химических веществ, в зависимости от того, что ниже, для подтверждения
того, что LD50 выше, чем такое значение. Для установления предельной испытуемой концентрации
используют минимум три повторности по двенадцать личинок от трех различных семей, а также соот
ветствующий контроль(и) и с использованием стандартного химического вещества. Если имеет место
статистически значимая гибель по сравнению с гибелью в контроле, то должно быть проведено полное
испытание.
7.4 Отбор личинок
7.4.1На D1 соту, содержащую личинки первой стадии развития (рисунок 3). переносят из улья в
лабораторию в изолированном контейнере для предупреждения изменения температуры и затем
выдерживают при температуре окружающей среды (не ниже 20 °С). Затем ее помещают в вытяжной
шкафсламинарным потоком иливдругие чистыеусловиядляпрививки. Сцелью предупреждения полу чения
ошибочных результатов, связанных с возможной неоднородностью личинок, настоятельно реко мендуется
отбирать только что вылупившиеся личинки, которые еще не имеют С-образную форму, и распределять
личинки от каиедой семьи произвольно в планшеты. Минимум двенадцать личинок от
4