ГОСТ 33775—2016
5 Достоверность испытания
Для испытания используютследующие критериидостоверности:
- в контрольном плаишете(ах)суммарная гибельличинок в периодс D4 no D7должна составлять
,115% в каждой повторности:
- в обработкестандартнымхимическим веществом гибельличинок(послепоправки, 8.1.1) должна
составлять > 50 % на D7.
6 Описание метода
6.1 Оборудование
6.1.1
Л
ичинок разводят в прививочных рамках из кристаллического полистирола (например, ref
CNB3, NICOTPLASTSociety), имеющих внутренний диаметр 9 мм и глубину8 мм. Рамки сначала стери
лизуют, например, погружением на30 мин вэтанол или другойстерилизующий раствор, азатем сушатв
вытяжном шкафу с ламинарным потоком. Каждую рамку помещают в лунку 48-луночного планшета.
Верхнюю часть прививочной рамки можно поддерживатьна уровне планшета, например размещением
надне лунки кусочка стоматологического ватного валика, смоченного 500 мкл стерилизующего раство
ра. объем которого увеличендобавлением 15% глицерина (масса/объем)(рисунок 1).
Прививочная рамка
Л
унка
Кусочек стоматологического ватного
валика смоченного 500 мкл
стерилизующего раствора объем
которого увеличен добавлением 15 %
глицерина (мзсса/объем)
Рисунок 1 — Рамка с личинками в лунке с культурой ткани
6.1.2 Данные планшеты помещают в герметичный эксикатор из плексигласа (например
Nalgene 5314-0120 или 5317-0180 в зависимости от требуемого объема) с чашкой, наполненной насы
щенным раствором сульфата калия (K2S04),для поддержания насыщенной водой атмосферы. Эксика
тор помещают в термостат, снабженныйсистемойпринудительной циркуляциивоздуха, длятого, чтобы
температура вокругэксикатора была одинаковой от 34 ССдо 35 °С. имаксимально близкой кдиапазону
температуры во время проведения испытания.
6.2 Тестовые организмы
Источникличинок
6.2.1
Л
ичинки отбирают от трех различных семей, каждая из которых представляет повторность
(см. 7.1.1). Семьи должны быть надлежащим образом накормленными, здоровыми (т. е. насколько это
возможно, должны отсутствовать признаки болезней ипаразитарныхинвазий),с известным источником
ифизиологическим состоянием.
6.2.2 Испытания проводятво время кладкияицкоролевой. В случае проведениясанитарнойобра
ботки (например, обработки против клещей или возбудителей заболеваний) регистрируютдату прове
дения обработки семей и указывают название использованного препарата. Не допускаются никакие
обработки за четыре неделидо начала испытания.
6.2.3 На D3 (рисунок 3) для обеспечения получения личинок от трех семей, королев минимум из
трех семей содержат в своей семье в изоляционной камередля вылупления. включающей пустую соту
или соту с формирующимся рабочим расплодом и пустые лунки (рисунок2). Изоляционную камеру для
вылупления помещают рядом с сотами, одержащими расплод. На D2максимум через 30чпосле выдер
живания в камере королеву выпускают из камеры после проверки на наличие свежих отложенных яиц.
В зависимости от фертильности королевы рекомендуется сократить время изоляции для минимизации
вариабельности в размере и возрасте личинок. Соту, содержащую яйца, оставляют в камере рядом с
расплодом на стадии инкубации идо вылупления (D1).
2