ГОСТ 33456—2015
5.4.3.3 Приготовление постоянных микропрепаратов
Постоянные микропрепараты используют при энтомологическом исследовании и для создания
справочных коллекций.
Образцы самцов тутовой щитовки, отобранные по 5.4.2.2, освобождают от энтомологического
клея, с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят в фарфоровый ти
гель с 5 %-ным раствором гидроокиси калия и нагревают на водяной бане до 60 °С в течение 1— 3 мин.
Затем насекомых переносят в дистиллированную воду, и далее на предметное стекло, наносят каплю
канадского бальзама и плавно накрывают покровным стеклом, предварительно прикоснувшись его ре
бром к капле бальзама.
Под микроскопом изучают основные диагностические признаки самца тутовой щитовки, измеряя
с помощью окуляр-микрометра длину тела и ширину груди, длину копулятивного аппарата (стилуса),
а также длину и ширину пластинки скутума среднегруди, а также просматривают голову самца на на
личие таких диагностических признаков, как четкий ячеистый рисунок на вентральной стороне головы
и на втором членике усика.
Образцы самок тутовой щитовки, отобранные по 5.4.2.2, помещают под стереомикроскоп и с по
мощью энтомологической булавки или препаровальной иглы приподнимают щитки и отбирают от трех до
пяти штук наиболее крупных самок.
Живых насекомых с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят
в чашку Петри с 70 %-ным раствором этилового спирта на 10 мин, затем тонкой энтомологической
булавкой под стереомикроскопом делают прокол в головной или дорсальной части тела и с помощью
энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят насекомых в фарфоровый тигель,
за полненный на 1/3 10 %-ным раствором гидроокиси калия.
Мертвых насекомых переносят в фарфоровый тигель, заполненный на 1/3 10 %-ным раствором
гидроокиси калия и делают прокол.
Тигель, зафиксированный держателем, подогревают на водяной бане при температуре 60 °С в
течение 5—20 мин для просветления тканей насекомого.
Затем раствор гидроокиси калия сливают в чашку Петри и легким прессованием энтомологиче
ской булавкой очищают насекомое от внутренностей, которые выходят через прокол.
С помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы очищенных насекомых пере
носят в дистиллированную воду, меняя ее несколько раз, затем в 75 %-ный и 96 %-ный растворы эти
лового спирта, последовательно погружая насекомое в каждый раствор на 2— 3 мин, далее — в фар
форовый тигель или предметное стекло с углублением с раствором основного или кислого фуксина на
10— 60 мин.
Насекомых помещают на поверхность краски, чтобы можно было легко их найти. Для удале
ния излишков красителя окрашенных насекомых переносят на предметное стекло с углублением на
5— 10 мин в 96 %-ный раствор этилового спирта, а затем насекомых энтомологической булавкой или
препаровальной иглой переносят на предметное стекло в каплю гвоздичного или бергамотового масла
на 20— 30 мин.
Фильтровальной бумагой, нарезанной узкими секторами, удаляют остатки гвоздичного или берга
мотового масла, наносят каплю канадского бальзама и плавно накрывают покровным стеклом, пред
варительно прикоснувшись его ребром к капле бальзама.
5.4.3.4 Маркировка и хранение микропрепаратов
При однородном видовом составе допускается помещать несколько насекомых на одно предмет
ное стекло.
Каждый микропрепарат снабжают этикеткой.
Готовые микропрепараты, находящиеся в строго горизонтальном положении, помещают на нагре
вательный столик при температуре 60 °С для подсушивания. Срок подсушивания микропрепаратов на
нагревательном столике составляет от 24 до 48 ч, либо их оставляют в помещении на планшетах при
температуре от 18 °С до 25 °С в течение двух — трех недель.
После полного высушивания микропрепараты хранят в горизонтальном положении на планшетах
или в вертикальном положении в коробках для микропрепаратов.
9