ГОСТ 33039—2014
чивается впромежутке между24 и48 ч,а вконтрольнойгруппеостаетсянапринятом постоянном уровне,
например, не более 10 %. целесообразно увеличить продолжительность теста до 96 ч (максимально).
Смертность регистрируют ежедневно и сравнивают с контролем. Результаты используют для расчета
величин LDM через 24 и 48 ч, а если опыт был более продолжительным, также и через 72 и 96 ч.
5 Достоверность теста
Тест считается достоверным, если выполняются следующие условия:
- средняя смертность пчел в контрольных группах не должна превышать 10 % к концу опыта;
- величинаШ 50веществасравнениядолжнасоответствоватьустановлвнномудиапазонузначений.
6 Описание теста
6.1 Отбор пчел
Должны использоваться молодые зрелые рабочиеособи одной расы, т. е. пчелы одинакового воз
раста. образа питания и пр. Следует использовать особей из правильно питающихся и здоровых коло
ний, насколько возможно, без признаков заболевания и с нормальным состоянием пчелиной матки, с
известной историей и физиологическим статусом. Их можно собирать утром в день использованиядля
опытов или вечером накануне проведения теста и содержать в тестовых условиях наследующий день.
Пчелы из ульев без пчелиного расплода также пригодны. Сбор пчел ранней весной или поздней осенью
нежелателен, так как вэтовремя меняетсяихфизиологическийстатус. Еслииспытанияпроводятранней
весной или поздней осенью, пчелы могут быть извлечены из инкубатора и подвергнуты кормлению пче
линым хлебом (пергой) и раствором сахарозы в течение 1недели. Пчелы, обработанные химическими
веществами, такими какантибиотики, противопаразитарные средства ит. п.. недолжны использоваться в
тестах на токсичность в течение 4 недель со дня окончания последней обработки.
6.2 Клетки для испытаний
Клетки должны быть легко очищаемыми, хорошо вентилируемыми и могут быть изготовлены из
любых материалов, например нержавеющей стали, проволочной сетки, пластика, дерева и т. п. Пред
почтительная численность группы; 10 пчел на клетку (садок). Размер клеток должен соответствовать
числу пчел, т. е. обеспечивать соответствующее пространство.
6.3 Уход и кормление
Процедуры поуходу, включая обработки и наблюдения, должны осуществляться в течениесвето
вогодня. Для кормленияиспользуют растворсахарозы в воде сконцентрацией500 г/л(50 %вес/объем),
пища должна предоставляться неограниченно (ad libitum). Для этого можно использовать стеклянную
трубочку (50 мм длиной, 10 мм шириной с открытым концом, сужающимся до 2 мм в диаметре).
6.4 Подготовка пчел
6.4.1 Отобранные пчелы могут быть подвергнуты анестезии обработкой углекислым газом или
азотом перед нанесенном испытуемого вещества. Количествоанестетикаи времяего воздействиядол
жны быть минимизированы. Умирающие пчелы не пригодны к использованию идолжны быть заменены
на здоровых до начала опыта.
6.4.2 Тестируемое вещество следует наносить в виде раствора в подходящем растворителе
(органическом или воде). Предпочтительным органическим растворителем является ацетон, но можно
использовать и другие малотоксичные для пчел растворители (диметилформамид, диметилсульфок-
сид). Для тестируемых воднодиспергируемых препаратов и высокополярных органичесхих веществ,
нерастворимых в органических растворителях, можетбыть рекомендован вариант их нанесения с раз
бавленными растворами смачивателей типа Аграл. Цитовет,
Л
юброл, Тритон, Твин (Agral, Citowett,
Lubrol, Triton, Tween).
6.4.3 Использование растворителей и диспергаторов следует учитывать при подготовке кон
трольных растворов. Так, если растворитель илидиспергатор использовалидля растворения испытуе
мого вещества, должны быть изучены 2 контроля; группа, обработанная водой, и группа, обработанная
растворителем /диспергатором.
6.4.4 Собранных пчел случайным образом распределяютв клеткахдля испытаний, которыев слу
чайном порядке расставлены в комнатедля испытаний. Можно организовать голодание пчел в течение
2