ГОСТ 33038—2014
дляпчел (ацетон, диметилформамид, диметилсульфоксид). Ихконцентрациязависитот растворимости
данного испытуемого вещества идолжна быть одной и той же для всех исследуемыхдоз тестируемого
вещества. Обычно достаточна 1 %-ная концентрация растворителя и ее не следует превышать.
6.5.2Соответствующим образом должны быть приготовлены и контрольные растворы: то есть,
если для растворения испытуемого вещества использовался растворитель или диспергатор, то кон
трольдолженбытьпредставленв2 вариантах: растворв воде ирастворсахарозыс растворителем (дис
пергатором) в концентрациях, используемых для приготовления доз тестируемого вещества.
7 Процедура теста
7.1 Тестируемая и контрольная группы
7.1.1 Количество доз и повторностей должны удовлетворять статистическим требованиям для
определений LD50 с 95 %-ным доверительным интервалом. Обычно для теста требуются 5 концентра
ций, представляющих геометрическую прогрессию с множителем, не превышающим 2,2 и охватываю
щим возможныйдиапазон LDS0.Однако разбавление иколичество используемыхконцентрацийзависят
от наклона кривой токсичности (доза — смертность) итребований статистического метода, выбранного
для оценки результатов теста. Предварительный тест позволяет выбратьсоответствующие концентра
ции для последующих дозировок.
7.1.2 Для тестированиядействия каждой выбраннойдозировкитребуется не менее3 испытуемых
групп пчел по 10 особей в каждой.
7.1.3 Кроме групп с тестируемым веществом необходимы, какминимум, три контрольные группы,
каждая по 10 пчел. В контрольные группы должно быть включено и тестирование действия используе
мых дополнительных растворителей (см. 6.5.2).
7.2 Токсичное вещество сравнения
Токсичное веществосравнениядолжно бытьвключеновсерии испытаний. Для перекрытияожида
емого диапазона LD50 следует использовать не менее 3 доз вещества сравнения, а для каждой
дозы выборка должна состоять, как минимум, из 3 клеток (повторностей) с 10 пчелами. Предпочти
тельнее использовать диметоат, для которого известна острая пероральная токсичность: LD50
(24 часа) = 0,10—0,35 мкг/пчелу [7]. Однако могут использоваться и другие токсичные для пчел
вещества, если для них имеется достаточно проверенных данных (например, паратион).
7.3 Распределение доз
Каждая тестовая группа должна получить 100—200 мкл 50 %-ного раствора сахарозы в воде,
содержащего испытуемое вещество в данной концентрации. Больший объем требуется для веществ с
низкой растворимостью, низкой токсичностью или с малой концентрацией в продукции, так как потребу
ются большиедоли раствора сахарозы. Количество обработанного продукта, потребляемого на группу
пчел, необходимо контролировать. После его потребления (обычно 3—4 ч) кормушка должна быть уда
лена из клетки изамененанадругую кормушку — с раствором, содержащим толькосахарозу. Этот корм
должен быть предоставлен в неограниченном количестве {ad libitum). Для некоторых веществ при их
высоких концентрациях может наблюдаться отказ от приема, в результате чего пчелы получают его в
меньшем количествеили несъедаютсовсем. Поистечениимаксимум6ч несъеденное количествообра
ботанной пищи должно бытьубрано и заменено на чистый раствор сахарозы, а потребленное количес тво
— зафиксировано (измерены объем/вес несъеденного).
7.4 Условия теста
Пчелыдолжны содержаться втемноте в экспериментальной комнате при температуре (25 ±2) еС.
Относительную влажность необходимо поддерживать около 50 %—70 % и регистрировать на протяже
нии всего теста.
7.5 Продолжительность тоста
Продолжительность опыта — 48 ч после того момента, когда испытуемое вещество было замене
но на чистый раствор сахарозы. Если смертность продолжает увеличиваться более чем на 10 % после
окончания первых 24 ч. опыт нужно продлить максимальнодо 96 ч при условии, что смертность на
кон троле менее 10 %.
3