ГОСТ 33038—2014
4 Принцип теста
Взрослых рабочих особей медоносных пчел подвергают воздействию серии доз тестируемого
вещества в растворе сахарозы. Затем пчелам предлагают аналогичное питание без тестируемого
вещества. Смертность регистрируют ежедневно на протяжении, поменьшей мере, 48 ч, исравнивают с
контролем. Если смертностьпчел вопытной группеувеличиваетсяв промежуткемежду24 и48 ч. а вкон
трольной группе остается на принятом постоянном уровне, например, не более £10 %. целесообразно
увеличить продолжительность теста до 96 ч (максимально). Результаты используютдля расчета вели
чин LDM через 24 и 48 ч. а если опыт был более продолжительным, также и через 72 и 96 ч.
5 Достоверность теста
Тест считается достоверным, если выполняются следующие условия:
- средняя смертность пчел в контрольных группах не должна превышать 10 % к концу опыта;
- величина LD50 вещества сравнения должна соответствовать установленному диапазону зна
чений.
6 Описание теста
6.1 Отбор пчел
Должны использоваться молодые зрелые рабочие особи одной расы. т. е. пчелы одинакового воз
раста. образа питания и пр. Следует использовать особей из правильно питающихся и здоровых коло
ний, насколько возможно, без признаков заболевания и с нормальным состоянием пчелиной матки, с
известными историейи физиологическим статусом. Их можнособиратьутром вдень использованиядля
опытов или вечером накануне проведения теста и содержать в тестовых условиях наследующий день.
Пчелы из ульев без расплода также пригодны. Сбор пчел ранней весной или поздней осенью нежелате
лен. так как в это время меняется их физиологический статус. Если испытания проводят ранней весной
или поздней осенью, пчелы могут быть извлечены из инкубатора и подвергнуты кормлению пчелиным
хлебом (пергой)ираствором сахарозы в течение 1недели. Пчелы, обработанные химическими вещест
вами. такими как антибиотики, противопаразитарные средства ит. п„ не должны использоваться в тес
тах на токсичность в течение 4 недель со дня окончания последней обработки.
6.2 Клетки для испытаний
Клетки должны быть легко очищаемыми, хорошо вентилируемыми и могут быть изготовлены из
любых материалов, например, нержавеющей стали, проволочной сетки, пластика, дерева и т. п. Пред
почтительная численность группы: 10 пчел на клетку. Размер клеток должен соответствовать числу
пчел. т. е. обеспечивать соответствующее пространство.
6.3 Уход и кормление
Процедуры поуходу, включая обработки и наблюдения, должны осуществляться в течениесвето
вогодня. Для кормленияиспользуют растворсахарозы в воде сконцентрацией500 г/л (50 %вес/объем).
После того какдана тестовая доза, пища должна предоставляться неограниченно (adlibitum). Система
кормления должна позволять регистрировать потребление пищи в каждой клетке (см. 7.3). Для этого
можно использовать стеклянную трубочку (50 мм длиной, 10 мм шириной с открытым концом, сужаю
щимся до 2 мм в диаметре).
6.4 Подготовка пчел
Собранные пчелы случайным образом распределяют в садках для испытаний, которые в случай
ном порядке расставлены в комнате для испытаний. Можно создать условия голодания пчел в течение
2ч до проведения теста. Желательно, чтобы пчелы были отлучены отпищи до обработки, чтобы содер
жимое кишечника всехпчел былоодинаковым на момент началатеста. Умирающиепчелы непригодны к
использованию и должны быть заменены на здоровых до начала опыта.
6.5 Подготовка доз
6.5.1Растворимые тестируемые вещества могутбыть непосредственно внесены в 50 %-ный рас
творсахарозы. Для веществ ипродукции с низкой растворимостью вводеможно использоватьдополни
тельные растворители (органические, эмульсификаторы. диспергирующие добавки), слаботоксичные
2