ГОСТ 33036—2014
(ацетоне, хлороформе, гексане). 1мл раствора капают пипеткой в колбу ииспаряют растворитель (опе
рация может быть повторена для достижения требуемого количества осадка вещества). Контрольный
сосуд должен быть аналогичнообработан 1мл дистиллированной воды или используемого органичес
кого растворителя. После высушивания 1мл дистиллированной воды переносятвдругойсосуддля сма
чивания бумаги, который накрывают стеклянным колпаком или полимерной пленкой с небольшим
отверстием.
Предварительныйтест предшествует более точномускриннинговомутесту. Он может бытьследу
ющим.
Для основногоскриннинговоготеста необходимоиспользоватьпять иболееуровней геометричес
кого ряда концентраций. Для каждой концентрации — 10 повторностей, помещая одного червя в сосуд.
Болееодногочервя помещатьне рекомендуется, т. к. гибельодного червяможет оказатьнеблагоприят
ное воздействие на других, находящихся с ним в сосуде. Точность, полученных при тестировании дан
ных. может быть увеличена доведением количества повторностей до 20. Дождевые черви перед
использованием их втестедолжны содержаться втечение 3часов на влажной фильтровальной бумаге,
чтобы удалитьсодержимое их кишечника. Затем их промывают ислегка подсушивают. Во время теста
сосудыдолжны находиться в горизонтальном положении накаком-либоподносе. Температуру во время
теста поддерживают в пределах (20 ± 2) вС. Первые48 ч сосуды держат в затемненном месте, а по про
шествии 72 ч оценивают гибель червей. Червь считается погибшим, если он не реагирует на легкие
механические раздражения, производимые по направлению от головы к хвосту.
7.3.2 Тест с искусственной почвой
Желателенпредварительныйтест, которыйопределяетдиапазон концентрацийвещества ивклю
чает следующий ряд концентраций: 0,01: 0.1: 1.0. 10; 100; 1000 мг/кг (тестируемого вещества в сухой
искусственной почвенной смеси). Для основного теста необходимо использовать пять концентраций
геометрического ранжированногоряда.
Тестс искусственной почвой итестируемым веществом необходимо проводить следующим обра
зом; непосредственно перед тестированием эмульсию или дисперсию химиката в дистиллированной
водесмешиваютс искусственным субстратом или равномерно разбрызгиваютпоегоповерхности. Если
тестируемое вещество нерастворимо в воде, оно может быть растворено в подходящем органическом
растворителе (ацетоне, гексане или хлороформе), после чего растворителю дают возможность испа
риться. Если вещество не растворяется, егодисперсию или эмульсию в количестве, соответствующем
750 г искусственной почвы (влажной массы), смешивают с 10 г мелкого кварцевого песка, после чего
полученную смесьприбавляютк 740 г влажного искусственногосубстрата. Такготовят смесьдля каждо
го тестируемого сосуда. В качестве растворителей химических веществ могут использоваться только
сильно летучие вещества. Перед тестированием растворитель должен испариться. Количество
испарившейся воды из искусственной смеси должно бытьадекватно восполнено.
В каждый сосуд добавляют 750 г влажной искусственной почвы и тестируемое вещество, после
чего на поверхность помещают 10 промытыхдождевых червей, которые адаптируются в течение 24 ч в
искусственном субстрате (без тестируемого вещества). Сосуды накрывают пластиковой пленкой для
предотвращения пересыхания содержимого и выдерживают 14дней.
Рекомендуются четыре повторности для каждой тестируемой концентрации химического вещест
ва. В каждом тесте используютчетыре контрольныхсосуда, причем искусственный субстратобрабаты
вают растворителем, используемым для тестируемых сосудов. Продолжительность теста 14 дней
(определение гибели проводят на 7-й и 14-й дни). Температура проведения теста (20 ± 2) °С. Необходи
моконтролироватьчервей втестируемойсмесивтечение всеготеста. Гибельподопытныхчервейопре
деляют, высыпая содержимое сосуда на стеклянную плоскую пластину (поднос), затем проводят
выборкучервей изсубстрата иопределяютихсостояние пореакциина механическиераздражения, про
изводимые от головы к хвосту. После оценки гибели всрок 7дней, черви и смесь искусственной почвы с
Количество тестируемого вещества
на фильтровальной бумаге
Концентрация раствора тестируемого вещества
1.0 мг/см2
0.1 мг/см2
0.01 мг/см2
0.001 мг/см2
0.0001 мг/см2
7 ■Ю "2 г/мл
7 Ю -3 г/мл
7 - 10~* г/мл
7 ■10"5 г/мл
7 • 10~6 г/мл
3